Электрохемилюминесцентный метод определения гормонов что это

Современный иммунохемилюминесцентный анализ: специфика проведения и виды

Проведение любых лабораторных исследований позволяет получить наиболее полную информацию по состоянию здоровья человека. Ведь точность лабораторных методов, применение современных технологий и высокая степень информативности — основные критерии данных методов исследования анализов. И иммунохемилюминесцентный анализ, представляя собой вариант исследования мочи или крови на предмет иммунных реакций антигенов с конкретным антителом, обладает уникальной точностью полученного результата (порядка 90%) и позволяет получить наибольшее количество информации при проведении исследования.

Иммунохемилюминесцентный анализ можно считать аналогом ИФА, проводят его на магнитных частицах, имеет особо высокую чувствительность и специфичность. Область применения такого анализа широка, однако наиболее часто используется он при исследовании состояния щитовидной железы, для выявления урогенитальных инфекций. Особенностью метода следует считать возможность его использования наравне с остальными лабораторными анализами для увеличения объема получаемой информации.

Что такое иммунохемилюминесцентный анализ

Благодаря постоянному развития лабораторных методов исследования сегодня каждый пациент имеет возможность получить исчерпывающую информацию о собственном здоровье. И иммунохемилюминесцентный анализ, представляющий собой лабораторные тесты, основанные на специфическом взаимодействии антигена и антитела, позволяет дополнить данные о текущем заболевании. И поскольку методы лечения напрямую зависят от полученной информации, результативность лечения будет связана с использованием при составлении наиболее эффективной схемы терапевтического и медикаментозного воздействия на патологический процесс.

Обычно иммунохемилюминесцентный анализ применяется при комплексном обследовании больного, при этом показания к его назначению могут быть различны. Высокая степень точности проводимого лабораторного исследования дает возможность избежать любой ошибки в ходе лечения, добиваясь высоких результатов при устранении характерных проявлений текущего заболевания и стабилизации общего состояния больного.

Возможности иммунохемилюминесцентного анализа в лабораторной диагностике сифилиса описаны в этом видео:

Кому его назначают

Метод взаимодействия антитела и антигена может использоваться для получения наиболее развернутой картины о состоянии больного при многих органических поражениях. Так, наиболее часто иммунохемилюминесцентный анализ применяется при проведении обследования состояния больного при подозрении на следующие заболевания:

• при диагностике инфекций урогенитальной области. При этом осуществляется выявление наличия различных видов патологических бактерий, которые могут заселять гениталии человека. Особенностью метода является обнаружение в сыворотке крови специфических веществ (иммуноглобулинов или белков), которые образуются в ходе жизнедеятельности патогенных микроорганизмов;
• для диагностического исследования состояния и функционирования щитовидной железы, которая отвечает за процессы роста организма, обмена веществ и психического развития. При нестабильной работе ее отмечается угнетенное состояния нервной системы, сбои в регулировании менструального цикла у женщин, неожиданная потеря массы тела и нестабильность психического состояния. Потому выявление причины перечисленных проявлений с помощью иммунохемилюминесцентного анализа является наиболее точным среди остальных методов диагностики;
• при проведении диагностического анализа при различных женских заболеваниях;
• при пренатальном скриниге беременных женщин, кода определяется степень выработки определенных веществ тканями плода. С помощью полученных результатов анализа можно получить представление о процессе развития плода, его функционировании и наличии начальных стадий органических нарушений;
• в процессе диагностирования гепатитов различных видов;
• также иммунохемилюминесцентный анализ используется в комплексном обследовании больных при подозрении у них онкологических заболеваний различного расположения;
• назначаться иммунохемилюминесцентный анализ может женщинам в период беременности, чтобы проследить степень развития плода, а также наличие вероятных отклонений в его развитии;
• его рекомендуют в период, когда планируется беременность: анализ помогает выявить болезни репродуктивной системы женщин, которые могут оказать отрицательное воздействие на новорожденного. Назначается проведение данного вида исследования за 2-3 месяца для планируемой берменности;
• иммунохемилюминесцентный анализ хорошо себя зарекомендовал при выявлении раковых поражений, что особенно часто применяется при диагностировании и определении стадии патологического процесса в предстательной железе у мужчин.

Также ИХЛА проводится при отеке Квинке и некоторых иных недугах.

Для чего используется принцип иммунохемилюминесцентного анализа, расскажем ниже.

Зачем его делать

• Процедура иммунохемилюминесцентного анализа выполняется при подозрении на сбои в работе щитовидной железы, когда отмечается набор характерных проявлений несбалансированности в ее работе.
• Также она назначается при комплексном обследовании на предмет наличия раковых процессов в организме, при возникновении жалоб у женщин на характерные боли.
• Суммарные антитела к микроорганизмам, являющимся возбудителями сифилиса, также выявляются при проведении иммунохемилюминесцентного анализа.

Этот метод исследования показан при выявлении следующих гормонов щитовидной железы:

• тиреотропный гормон;
• свободный и общий ТЗ;
• выявление антител к тиреоглобулину;
• полимерная цепная реакция.

Виды метода иммунохемилюминесцентного анализа описаны ниже.

Виды процедуры

Существует несколько наиболее распространенных видов данного вида лабораторного исследования. Они различаются степенью концентрации исходного раствора, концентрацией действующего вещества. Однако наиболее часто используемым следует считать метод выявления степени концентрации гонадотропных гормонов, который применяется при различных методах диагностирования.

О том, проводят ли иммунохемилюминесцентный анализ на сифилис, ВИЧ и другие недуги, узнаем ниже.

Показания для проведения

Использование такого метода лабораторного исследования, как иммунохемилюминесцентный анализ, показано при подозрении на текущий онкологический процесс в организме, при наличии сопутствующих признаках поражения предстательной железы у мужчин, а также во время течения беременности и при подготовке к ней.

Используется иммунохемилюминесцентный анализ обычно в комплексном обследовании больного: это позволяет получить максимально развернутую картину о текущем заболевании, составить наиболее действенную схему лечебного воздействия.

Важно использование рассматриваемого метода при лечении людей старше 40-45 лет, когда оценивается степень действенности выбранного метода лечения. Многими врачами рекомендуется проведение иммунохемилюминесцентного анализа при подозрении на поражение щитовидной железы и ухудшении процессе ее функционирования.

А это видео расскажет, как иммунохемилюминесцентный анализатор проводит диагностику:

Противопоказания для проведения

Однако существует ряд ситуаций и состояний, при которых проведение данного метода лабораторного исследования может быть противопоказан. К наиболее важным противопоказаниям можно отнести:

1. Наличие аллергии в вводимому антителу.
2. Невосприимчивость к данному виду тестирования на основании специфических реакций организма, вследствие чего может быть получен ложный результат.
3. Лечение текущего заболевания с помощью медикаментов, которые также могут оказать влияние на результат анализа.

Также противопоказанием следует считать детский возраст.

Безопасность метода

Проведение иммунохемилюминесцентного анализа является полностью безопасной процедурой, однако во время беременности она должна проводиться с учетом особенностей организма беременной женщины для предотвращения возникновения аллергической реакции на антигены.

Также проведение ее осуществляется только в условиях медицинского учреждения и под присмотром медперсонала.

Подготовка к процедуре

Для получения наиболее точного результата следует правильно подготовиться к проведению данной процедуры. Подготовка состоит из нескольких этапов:

1. Сдача крови проводится в утреннее время, при этом на сдачу крови больной должен приходить натощак.
2. Накануне не рекомендуется получать значительной физической и психологической нагрузки, испытывать сильный стресс.
3. На процедуру следует приходить в ровном, спокойном состоянии.
4. Перед проведением иммунохемилюминесцентного анализа рекомендуется отказаться от приема медикаментов, оказывающих влияние на полученный результат.

Также следует при назначении данного метода исследования сообщить врачу о проводимом медикаментозном лечении, использовании кортикостероидов и транквилизаторов.

Ощущения пациента

• Сама процедура иммунохемилюминесцентного анализа осуществляется в процедурном кабинете медицинской сестрой. Кровь берется из локтевой вены, при этом следует принять наиболее удобное положение тела и постараться расслабиться.
• Врачом берется кровь из вена, которая затем отправляется на анализ.
• Ощущения при данной процедуре соответствуют степени чувствительности пациента к взятию крови из вены, болезненность обычно не слишком сильная.

Расшифровка результатов иммунохемилюминесцентного анализа описана ниже.

Расшифровка результатов

Осуществление расшифровки проходит в кабинете врача, который ведет процесс обследования больного. Сегодня существует метод автоматического расшифровывания полученных результатов при иммунохемилюминесцентном анализе.

Стоимость проводимой процедуры зависит от ценовой политики медицинского учреждения. В среднем цена может колебаться от 12 120 до 24 520 рублей в зависимости от количества повторений процедуры и ряда сопутствующих анализов, необходимых для уточнения диагноза.

Автоматический иммунохемилюминесцентный анализатор Pathfast

Источник статьи: http://gidmed.com/dermatologiya/diagnostika-derm/immunohemilyuminestsentnyj-analiz.html

Электрохемилюминесцентный метод определения гормонов что это

Электрохемилюминесцентный метод определения гормонов что это

Подготовительные действия к сдаче анализа крови на женские половые гормоны

Норма УЗИ щитовидной железы у детей

Для лечения щитовидки наши читатели успешно используют Монастырский чай. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Щитовидная железа как важный эндокринный орган принимает непосредственное участие в развитии и росте ребенка.

Полноценное функционирование эндокринной системы во главе с железой способно обеспечить нормальную работу детского организма в целом.

Родителям важно знать нормы объема щитовидной железы у детей для того, чтобы вовремя обнаружить возникшую патологию и предупредить ее дальнейшее развитие.

Значение щитовидной железы

В тканях щитовидной железы происходит физиологическая выработка важных тиреоидных гормонов — трийодтиронина, тироксина и кальцитонина, которые участвуют в метаболизме.

От этих гормонов напрямую зависят энергетические процессы в организме, обмен веществ, рост скелета, формирование опорно-двигательной системы, состояние центральной нервной системы, работа почек и органов пищеварения, а также общее физическое развитие ребенка.

Вот почему полноценная работа железы необходима в любом возрасте, особенно если дело касается детей.

Для ребенка потенциально-опасна как гиперфункция железы, так и дефицит тиреоидных гормонов, который чреват развитием кретинизма — самого тяжелого осложнения врожденной формы гипотиреоза.

Чтобы определить состояние эндокринного органа, в первую очередь, необходимо исследовать уровень гормонов.

Нормы гормонов щитовидки у детей могут меняться в зависимости от возраста ребенка, но эти показатели не следует сравнивать с показателями взрослого человека.

Также у детей всегда, в первую очередь, определяется уровень тиреотропного гормона — секрета гипофиза, поскольку именно он несет ответственность за регуляцию выработки гормонов фолликулами железы.

Если уровень тиреотропного гормона будет выходить за пределы нормы, значит речь идет о возможной эндокринной патологии, и вслед за этим ребенку назначается комплексное исследование тиреоидных гормонов.

В наши дни существует обязательный перечень исследований скринингового типа, которые необходимо проводить каждому новорожденному.

В условиях родильного дома на пятые сутки после появления на свет обязательно берется анализ из пяточки ребенка для исследования гормонов железы.

Если в ходе этого диагностического мероприятия будут обнаружены какие-либо отклонения от нормы, — малышу безотлагательно назначается консервативное лечение.

Щитовидная железа: норма у детей

Начиная с рождения и до достижения малышом двух лет физиологический объем эндокринного органа не должен превышать 0,84 мл.

До шести лет этот показатель способен вырасти до 2,9 мл.

Интенсивный рост щитовидной железы отмечается в подростковом возрасте, особенно в промежутке между 13 и 15 годами: если у тринадцатилетних мальчиков объем органа варьируется в пределах 6,0-8,7 мл, то в пятнадцать лет нормой принято считать объем 8,1-11,1 мл.

У девочек-подростков размер щитовидной железы будет несколько больше: в тринадцать лет 7,0-9,5 мл, в пятнадцать лет 9,0-12,4 мл.

Приведенная выше норма размеров щитовидной железы у детей может варьироваться в зависимости от особенностей организма, но не выходить за пределы допустимых значений.

При любом отклонении от нормы, речь идет о патологическом состоянии эндокринного органа и нарушении его функционального значения. Заболевание может быть врожденным или приобретенным.

Важно вовремя определить наличие патологии и выяснить причину возникших отклонений.

Для этого нужно диагностировать состояние гормонального фона ребенка, структурное строение и объем щитовидной железы.

По статистике, раннее обнаружение эндокринной патологии в детском возрасте имеет благоприятный прогноз на выздоровление и адаптационные возможности ребенка к современной жизни.

Болезни щитовидной железы, как правило, быстро и легко лечатся, что является несомненным преимуществом в детской эндокринологии.

Как определить размеры щитовидной железы

С профилактической целью обязательно измеряется щитовидная железа ребенка — размеры, норма которых является важным диагностическим моментом на наличие возможных патологий органа.

Способы измерения могут быть следующими:

• исследование щитовидной железы с помощью пальпации проводится эндокринологом путем ощупывания каждой доли органа, с целью определения его структуры, состояния и консистенции;
• исследование с помощью узи щитовидной железы у детей, норма и патологии которой будут определены с высокой точностью;
• исследование с помощью рентгенографии и компьютерной томографии, — это самые высокоинформативные методы диагностики.

УЗИ щитовидной железы у детей

Ультразвуковое исследование с высокой точностью определяет патологии эндокринного органа.

Нормы показателей щитовидной железы у детей во время УЗИ-диагностики должны быть следующими.

Форма здоровой щитовидной железы всегда будет иметь ровные и четкие контуры.

Расположенные рядом с органом лимфатические узлы не должны быть увеличены.

Размер паращитовидных желез должен составлять 4х5х5 мм. В случае любых обнаруженных отклонений речь идет о возможном заболевании.

Если отмечается высокая эхогенность органа и его неоднородное строение, — это говорит о воспалительном процессе в тканях железы.

Уплотнения, которые можно отличить от здоровых тканей, свидетельствуют о наличии доброкачественного процесса — узловых изменениях, аденоме, или злокачественного процесса — рака.

Обнаруженная полость округлой формы с четкими границами и жидким содержимым является кистой.

Если ультразвуковое исследование подтвердило рост щитовидной железы, то есть ее размеры выходят за границы нормы, — будет диагностирована гиперплазия органа или диффузный токсический зоб.

В противном случае, уменьшенные размер железы говорят о гипотиреозе — недостаточной функции органа.

Отечность на фоне заметного увеличения железы информируют врача о наличии тиреоидита — воспалительного процесса в ее тканях. В зависимости от причины заболевания назначается соответствующее лечение.

Щитовидная железа будет в норме, если о результатам УЗИ-исследования не возникнет отклонений в измерении объема, а также формы и структуры органа.

При любых обнаруженных изменениях следует обратиться к врачу.

Болезни щитовидной железы в детском возрасте

В последние годы число детей, страдающих заболеваниями щитовидной железы, неуклонно растет.

Возможно, причиной этому становится постоянно ухудшающаяся экология и некачественное питание.

Основными причинами патологий эндокринной системы по-прежнему остаются хроническая нехватка йода в организме и неблагоприятная наследственность.

В большинстве случаев проблемы с щитовидной железой у ребенка начинаются еще в период внутриутробного развития, если в организме будущей матери отсутствует необходимое количество йода или имеются заболевания эндокринного типа.

В этом случае ребенок еще до рождения сталкивается с серьезными проблемами, которые отражаются на развитии и состоянии его собственной щитовидной железы.

К примеру, выраженный гипотиреоз беременной женщины может стать причиной самопроизвольного прерывания беременности, наступления преждевременной родовой деятельности, формирования пороков развития у плода, рождения ребенка с физическими патологиями и недостаточным интеллектом.

Как и взрослое население, дети подвержены следующим заболеваниям щитовидной железы:

Для лечения щитовидки наши читатели успешно используют Монастырский чай. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Гипотиреоз

Недостаточная выработка щитовидной железой тиреоидных гормонов называется гипотиреозом.

Это заболевание встречается у одного новорожденного на четыре тысячи рождений, при чем среди девочек патология диагностируется в несколько раз чаще.

Дефицит гормонов щитовидной железы негативно отражается на росте и развитии всех органов и систем, а особенно на интеллекте ребенка.

Соответствующую лечебную терапию следует начинать с первых дней обнаружения гипотиреоза, чтобы максимально смягчить возможные последствия заболевания.

Гипертиреоз

Состояние характеризуется избыточной выработкой тиреоидных гормонов, что приводит к ускорению всех жизненно-важных процессов, протекающих в организме.

Симптомами гипертиреоза являются нарушение сердечного ритма в сторону тахикардии, повышение кровяного давления, выраженная нервозность, раздражительность и плаксивость, склонность к судорожному синдрому и гиперактивность.

Если у ребенка диагностирован гипертиреоз, важно незамедлительно начинать его лечить, так как болезнь, оставленная без внимания, медленно разрушает организм, вызывая осложнения сердечно-сосудистой системы, органов пищеварительного тракта, опорно-двигательного аппарата.

В конечно итоге нелеченная гиперфункция железы приводит к опасному для жизни состоянию — тиреотоксическому кризу.

Тиреоидит Хашимото

Это аутоиммунная патология эндокринной системы, в результате которого угнетаются функции железы и происходит ее постепенное разрушение собственными антителами иммунной системы.

Симптомами болезни являются

• выраженная сухость кожных покровов,
• повышенная утомляемость и сонливость,
• набор лишнего веса.

Лечение щитовидной железы в детском возрасте

Лечением эндокринных заболеваний в детском возрасте занимается врач-эндокринолог.

Своевременная диагностика и раннее обнаружение патологического процесса чаще всего эффективно поддается терапевтическому воздействию и имеет благоприятный прогноз на выздоровление.

Что такое горячие и холодные узлы щитовидки?

Если диагностирован горячий узел щитовидной железы, что это такое, не знает практически никто.

А это некое состояние щитовидной железы, сопровождающееся возникновением опухоли в ее тканях.

Подобные новообразования бывают разными: беспокоящими и бессимптомными, злокачественными и доброкачественными.

Лечение, соответственно, выбирается от вида патологии.

Некоторые опухоли можно не трогать, так как они не угрожают жизни человека, другие же представляют серьезную опасность.

Горячие узлы щитовидной железы как раз и относятся к таким опасным новообразованиям.

Чтобы не довести до такого и не чувствовать постоянную зависимость от таблеток, рекомендуем Монастырский Чай — единственное натуральное средство, которое разработано для восстановления функции щитовидной железы, общей нормализации гормонального фона и профилактики заболеваний, связанных с его нарушением. Он состоит ТОЛЬКО из натуральных компонентов и не имеет неприятных побочных действий.
Данный препарат не продается в аптеках, и его не рекламируют в интернете. Чтобы вы не подумали, что вам втюхивают очередную «панацею от всех болезней», я не буду расписывать, какое это действенное средство… Если интересно, читайте всю информацию о нем сами. Вот ссылка на официальный сайт.

Причины развития узлов в щитовидной железе

У большинства людей узлы растут медленно, почти всю жизнь и становятся заметны только в глубокой старости. Они не представляют опасности.

Чаще всего появляются у женщин. Если же узел вырос в короткий срок и начал влиять на продуцирование гормонов, то такое новообразование является серьезной угрозой не только здоровью, но и самой жизни пациента.

Причины, являющиеся предпосылками для роста узлов в щитовидной железе:

1. Генетическая предрасположенность.
2. Недостаточное содержание йода в организме человека.
3. Лучевая терапия.
4. Следствие отравления токсическими веществами.

Какие бы причины не вызвали образование узлов, быстроразвивающаяся болезнь требует срочного изучения и экстренного лечения.

Холодные и горячие узлы

Занимаясь раскрытием вопроса о горячих узлах в щитовидной железе, нужно упомянуть о возникновении терминов «холодный» и «горячий» узлы.

Они возникли при изучении щитовидной железы с помощью радиоизотопного сканирования.

Известно, что клетки железы отделяют йод от выделяемых гормонов, поэтому, воздействуя на них радиоактивным йодом, можно увидеть степень поглощения клетками данного элемента прямо на экране сканера.

Холодные узлы состоят из клеток, не поглощающих йод, а горячие узлы, соответственно, из клеток, принимающих его.

В науке существует определенная статистика, которая показывает, что в большинстве случаев узлы в щитовидной железе состоят из холодных клеток: примерно 80%, а горячих — всего около 5%.

Остальные 15% — это так называемые теплые узлы. Все эти новообразования доброкачественные.

Холодный узел щитовидной железы не выделяет никаких гормонов, то есть эта опухоль абсолютно нейтральна, и йод она не поглощает совсем.

Такое явление в медицине получило следующее название: гипотиреоз. Это заболевание проявляется поздним физическим развитием ребенка, характерным разрезом глаз, слабой мускулатурой и значительным отставанием в психическом развитии.

Если говорить коротко, то врожденный гипотиреоз вызывает кретинизм.

Теплый узел выделяет такое же количество тиреоидных гормонов, что и здоровая ткань щитовидной железы.

Узел в щитовидной железе, поглощающий йод, то есть горячий, выделяет повышенное количество тиреоидных гормонов — это и есть причины гипертиреоза.

Диагностические мероприятия

Для того чтобы обследовать щитовидную железу на предмет наличия опухолей, применяется ультразвуковое исследование.

Однако этот метод может обнаружить узел, но не сообщить, какого характера клетки его образовали, то есть какой это узел: горячий, теплый или холодный.

УЗИ может обнаружить довольно маленькую опухоль: до 1 см в диаметре.

Определить активность клеток опухоли можно с помощью биопсии. В ходе этого исследования изучается несколько клеток щитовидной железы, полученных с помощью длинной иглы, вводимой в орган, а точнее в опухоль.

Данная процедура для больного проходит как глубокий внутримышечный укол: неприятный, но терпеть его можно. А главное — биопсия обязательно нужна для назначения правильного лечения.

Чтобы избежать травмирования и добиться большей эффективности, биопсия проводится под контролем ультразвукового наблюдения.

Данная процедура определяет характер опухоли: злокачественная она или доброкачественная, а также активность клеток в ней.

Если биопсия показала злокачественную опухоль, то лечить ее возможно только 1 способом: только операция по удалению пораженного органа избавит больного от недуга.

В других ситуациях терапия предполагает различные варианты.

В список диагностических мероприятий обязательно входит:

1. Лабораторное изучение крови пациента. При этом определяется уровень тиреоидных гормонов, чтобы подтвердить или исключить гипотиреоз.
2. Изучение мочи.
3. Анализ работа сердца с помощью электрокардиограммы.
4. Проводится рентгеновское исследование грудной клетки.

Обязательно назначается сцинтиграфия — это процедура, с помощью которой можно увидеть на экране, какими являются обнаруженные узлы: холодными, теплыми или горячими.

Для этого в кровь пациента вводится радиоактивный изотоп, «подсвечивающий» клетки щитовидной железы.

Данное вещество для человека безопасно и уже через несколько часов выводится из организма с мочой.

Симптомы появления горячего узла

Лечение горячего узла зависит от правильной его диагностики.

Но, как и при любом другом заболевании, существует ряд симптомов, позволяющих сделать вывод, что у человека развивается горячий узел в щитовидной железе.

Так как орган находится в горле, то появление опухоли заставляет человека испытывать постоянное удушье, дискомфорт при глотании и пропадание голоса.

У людей с дефицитом веса опухоль на горле можно заметить невооруженным глазом или легко ощупать пальцами, особенно если пациент женщина, ведь на горле без адамова яблока любое новообразование видно очень хорошо.

В случае с мужчинами опухоль хорошо видна, если она поразила часть правой или левой доли щитовидной железы.

Если опухоль слишком мала, то о ее наличии можно судить по следующим проявлениям:

• повышенная сонливость;
• быстрая утомляемость;
• волосы больного становятся тонкими и ломкими;
• у больного появляются психологические проблемы: он становится крайне неуравновешенным;
• появляются частые запоры.

Данные проявления характерны, если у больного гипотиреоз.

При возникновении в щитовидной железе именно горячих узлов, или гипертиреоза, проявления могут быть следующими:

• больной постоянно испытывает сильные голод и жажду;
• масса тела больного быстро теряется;
• психология такого человека также становится ранимой: он раздражается по пустякам;
• тремор конечностей;
• аритмия;
• в глазах появляется лихорадочный блеск;
• в редких случаях гипертиреоз проявляется выпирающими глазными яблоками.

Лечение гипертиреоза

Лечение горячего узла щитовидной железы, как правило, хирургическое. Консервативным методом прекратить интенсивную выработку тиреоидных гормонов практически невозможно.

Лечение медикаментами проводится лишь как подготовка к операции по удалению самой опухоли или всей железы целиком.

Пациент принимает синтетические тиреоидные гормоны, а также натуральные вещества, выделенные из грецкого ореха, черноголовки и других лекарственных растений.

После операции по удалению доли щитовидной железы или всего органа уровень тиреоидных гормонов резко падает, и для поддержания их на необходимом уровне человек до конца жизни должен принимать, прописанные ему заменяющие препараты.

Как правило, этой заменой является L-тироксин. Если больной после операции станет пренебрегать заместительной терапией, то у него может развиться гипотиреоз.

Профилактика появления горячих и холодных узлов в щитовидной железе

Профилактика появления различных опухолей на щитовидной железе довольна проста: надо внимательно поддерживать необходимый уровень йода в организме.

Этим веществом богата, например, морская капуста, значит, надо регулярно ее употреблять в пищу.

Самым простым способом поддержания приемлемого уровня йода в организме является употребление в пищу йодированной соли. Рекомендуем ознакомиться со свойствами обогащенной молекулами йода воды Йодис-Концентрат.

Этими нехитрыми действиями можно значительно снизить риск возникновения опухоли.

И не нужно ждать, пока симптомы узла щитовидной железы дадут о себе знать: следует 1 — 2 раза в год проходить осмотр у врача эндокринолога.

Это поможет не только вовремя заметить растущую опухоль, а значит, значительно упростить лечение, но и не допустить ее появления в принципе.

Надо будет только придерживаться советов врача в диете и образе жизни.

Современный иммунохемилюминесцентный анализ: специфика проведения и виды

Проведение любых лабораторных исследований позволяет получить наиболее полную информацию по состоянию здоровья человека. Ведь точность лабораторных методов, применение современных технологий и высокая степень информативности — основные критерии данных методов исследования анализов. И иммунохемилюминесцентный анализ, представляя собой вариант исследования мочи или крови на предмет иммунных реакций антигенов с конкретным антителом, обладает уникальной точностью полученного результата (порядка 90%) и позволяет получить наибольшее количество информации при проведении исследования.

Иммунохемилюминесцентный анализ можно считать аналогом ИФА, проводят его на магнитных частицах, имеет особо высокую чувствительность и специфичность. Область применения такого анализа широка, однако наиболее часто используется он при исследовании состояния щитовидной железы, для выявления урогенитальных инфекций. Особенностью метода следует считать возможность его использования наравне с остальными лабораторными анализами для увеличения объема получаемой информации.

Что такое иммунохемилюминесцентный анализ

Благодаря постоянному развития лабораторных методов исследования сегодня каждый пациент имеет возможность получить исчерпывающую информацию о собственном здоровье. И иммунохемилюминесцентный анализ, представляющий собой лабораторные тесты, основанные на специфическом взаимодействии антигена и антитела, позволяет дополнить данные о текущем заболевании. И поскольку методы лечения напрямую зависят от полученной информации, результативность лечения будет связана с использованием при составлении наиболее эффективной схемы терапевтического и медикаментозного воздействия на патологический процесс.

Обычно иммунохемилюминесцентный анализ применяется при комплексном обследовании больного, при этом показания к его назначению могут быть различны. Высокая степень точности проводимого лабораторного исследования дает возможность избежать любой ошибки в ходе лечения, добиваясь высоких результатов при устранении характерных проявлений текущего заболевания и стабилизации общего состояния больного.

Возможности иммунохемилюминесцентного анализа в лабораторной диагностике сифилиса описаны в этом видео:

Кому его назначают

Метод взаимодействия антитела и антигена может использоваться для получения наиболее развернутой картины о состоянии больного при многих органических поражениях. Так, наиболее часто иммунохемилюминесцентный анализ применяется при проведении обследования состояния больного при подозрении на следующие заболевания:

• при диагностике инфекций урогенитальной области. При этом осуществляется выявление наличия различных видов патологических бактерий, которые могут заселять гениталии человека. Особенностью метода является обнаружение в сыворотке крови специфических веществ (иммуноглобулинов или белков), которые образуются в ходе жизнедеятельности патогенных микроорганизмов;
• для диагностического исследования состояния и функционирования щитовидной железы, которая отвечает за процессы роста организма, обмена веществ и психического развития. При нестабильной работе ее отмечается угнетенное состояния нервной системы, сбои в регулировании менструального цикла у женщин, неожиданная потеря массы тела и нестабильность психического состояния. Потому выявление причины перечисленных проявлений с помощью иммунохемилюминесцентного анализа является наиболее точным среди остальных методов диагностики;
• при проведении диагностического анализа при различных женских заболеваниях;
• при пренатальном скриниге беременных женщин, кода определяется степень выработки определенных веществ тканями плода. С помощью полученных результатов анализа можно получить представление о процессе развития плода, его функционировании и наличии начальных стадий органических нарушений;
• в процессе диагностирования гепатитов различных видов;
• также иммунохемилюминесцентный анализ используется в комплексном обследовании больных при подозрении у них онкологических заболеваний различного расположения;
• назначаться иммунохемилюминесцентный анализ может женщинам в период беременности, чтобы проследить степень развития плода, а также наличие вероятных отклонений в его развитии;
• его рекомендуют в период, когда планируется беременность: анализ помогает выявить болезни репродуктивной системы женщин, которые могут оказать отрицательное воздействие на новорожденного. Назначается проведение данного вида исследования за 2-3 месяца для планируемой берменности;
• иммунохемилюминесцентный анализ хорошо себя зарекомендовал при выявлении раковых поражений, что особенно часто применяется при диагностировании и определении стадии патологического процесса в предстательной железе у мужчин.

Также ИХЛА проводится при отеке Квинке и некоторых иных недугах.

Для чего используется принцип иммунохемилюминесцентного анализа, расскажем ниже.

Зачем его делать

• Процедура иммунохемилюминесцентного анализа выполняется при подозрении на сбои в работе щитовидной железы, когда отмечается набор характерных проявлений несбалансированности в ее работе.
• Также она назначается при комплексном обследовании на предмет наличия раковых процессов в организме, при возникновении жалоб у женщин на характерные боли.
• Суммарные антитела к микроорганизмам, являющимся возбудителями сифилиса, также выявляются при проведении иммунохемилюминесцентного анализа.

Этот метод исследования показан при выявлении следующих гормонов щитовидной железы:

• тиреотропный гормон;
• свободный и общий ТЗ;
• выявление антител к тиреоглобулину;
• полимерная цепная реакция.

Виды метода иммунохемилюминесцентного анализа описаны ниже.

Виды процедуры

Существует несколько наиболее распространенных видов данного вида лабораторного исследования. Они различаются степенью концентрации исходного раствора, концентрацией действующего вещества. Однако наиболее часто используемым следует считать метод выявления степени концентрации гонадотропных гормонов, который применяется при различных методах диагностирования.

О том, проводят ли иммунохемилюминесцентный анализ на сифилис, ВИЧ и другие недуги, узнаем ниже.

Показания для проведения

Использование такого метода лабораторного исследования, как иммунохемилюминесцентный анализ, показано при подозрении на текущий онкологический процесс в организме, при наличии сопутствующих признаках поражения предстательной железы у мужчин, а также во время течения беременности и при подготовке к ней.

Используется иммунохемилюминесцентный анализ обычно в комплексном обследовании больного: это позволяет получить максимально развернутую картину о текущем заболевании, составить наиболее действенную схему лечебного воздействия.

Важно использование рассматриваемого метода при лечении людей старше 40-45 лет, когда оценивается степень действенности выбранного метода лечения. Многими врачами рекомендуется проведение иммунохемилюминесцентного анализа при подозрении на поражение щитовидной железы и ухудшении процессе ее функционирования.

А это видео расскажет, как иммунохемилюминесцентный анализатор проводит диагностику:

Противопоказания для проведения

Однако существует ряд ситуаций и состояний, при которых проведение данного метода лабораторного исследования может быть противопоказан. К наиболее важным противопоказаниям можно отнести:

1. Наличие аллергии в вводимому антителу.
2. Невосприимчивость к данному виду тестирования на основании специфических реакций организма, вследствие чего может быть получен ложный результат.
3. Лечение текущего заболевания с помощью медикаментов, которые также могут оказать влияние на результат анализа.

Также противопоказанием следует считать детский возраст.

Безопасность метода

Проведение иммунохемилюминесцентного анализа является полностью безопасной процедурой, однако во время беременности она должна проводиться с учетом особенностей организма беременной женщины для предотвращения возникновения аллергической реакции на антигены.

Также проведение ее осуществляется только в условиях медицинского учреждения и под присмотром медперсонала.

Подготовка к процедуре

Для получения наиболее точного результата следует правильно подготовиться к проведению данной процедуры. Подготовка состоит из нескольких этапов:

1. Сдача крови проводится в утреннее время, при этом на сдачу крови больной должен приходить натощак.
2. Накануне не рекомендуется получать значительной физической и психологической нагрузки, испытывать сильный стресс.
3. На процедуру следует приходить в ровном, спокойном состоянии.
4. Перед проведением иммунохемилюминесцентного анализа рекомендуется отказаться от приема медикаментов, оказывающих влияние на полученный результат.

Также следует при назначении данного метода исследования сообщить врачу о проводимом медикаментозном лечении, использовании кортикостероидов и транквилизаторов.

Ощущения пациента

• Сама процедура иммунохемилюминесцентного анализа осуществляется в процедурном кабинете медицинской сестрой. Кровь берется из локтевой вены, при этом следует принять наиболее удобное положение тела и постараться расслабиться.
• Врачом берется кровь из вена, которая затем отправляется на анализ.
• Ощущения при данной процедуре соответствуют степени чувствительности пациента к взятию крови из вены, болезненность обычно не слишком сильная.

Расшифровка результатов иммунохемилюминесцентного анализа описана ниже.

Расшифровка результатов

Осуществление расшифровки проходит в кабинете врача, который ведет процесс обследования больного. Сегодня существует метод автоматического расшифровывания полученных результатов при иммунохемилюминесцентном анализе.

Стоимость проводимой процедуры зависит от ценовой политики медицинского учреждения. В среднем цена может колебаться от 12 120 до 24 520 рублей в зависимости от количества повторений процедуры и ряда сопутствующих анализов, необходимых для уточнения диагноза.

Автоматический иммунохемилюминесцентный анализатор Pathfast

Электрохемилюминесцентный метод определения гормонов что это

За последние несколько лет в результате разработки более тонких, чувствительных и специфических методов определения гормонов клиническая эндокринология во многом превратилась из своего рода искусства в раздел прикладной биохимии, физиологии и фар­макологии. Этот прогресс оказался возможным благодаря выделе­нию и последующей биологической и биохимической характерис­тике различных высокоочищенных полипептидных гормонов, стероидов, витаминов, производных небольших полипептидов и аминокислот, которые относят к гормонам, а также получению меченных радиоактивными атомами гормонов с высокой удельной активностью. Многие эндокринные заболевания распознаются или по крайней мере предполагаются на основании присутствия слиш­ком большого или слишком малого количества нормально секре­тируемого гормона. Возможность определения низкого уровня гор­монов в биологических жидкостях оказала существенную помощь в упрощении диагностических исследований.

Для количественного определения гормонов в тканях и жидких средах организма вначале применялись относительно грубые и громоздкие биологические методы. С разработкой более чувстви­тельных радиоиммунологических и радиорецепторных методик появилась возможность использовать более быстрые и экономич­ные способы определения гормонов, которые по существу стали краеугольным камнем клинической эндокринологии. Несмотря на свои недостатки, классические биологические методы сохранили значение для полной характеристики гормона, особенно в услови­ях возможного расхождения его биологических и иммунологиче­ских свойств. К счастью, уровень гормонов, определяемый радио­иммунологическим и биологическим методами коррелируют друг с другом. В связи с этим концентрация гормонов, определяемая с по­мощью радиоиммунологического метода, обычно свидетельствует об уровне биологически активных гормонов в крови. Эта связь достаточно случайна, поскольку биологическая и иммунологиче­ская активность, как правило, отражает разные свойства, и прису­ща она разным участкам молекулы гормона.

Получение высокоочищенных гормональных препаратов не про­сто дало возможность разработать чувствительные методы измере­ния концентрации гормонов, но и снабдило исследователей неоце­нимым средством углубленного проникновения в механизмы их клеточного действия. С помощью этих средств выяснилось, что клинические расстройства могут обусловливаться нарушением не только секреции, но и действия гормонов в силу качественных или количественных изменений рецепторов отдельных гормонов, равно как и внутриклеточных биохимических механизмов опосредования гормонального эффекта. В настоящей главе описаны общие прин­ципы надежности методов биологического, радиоиммунологическо­го и радиорецепторного определения гормонов и общие требова­ния, предъявляемые к этим методам. В большинстве случаев ис­следования весьма сложны, требуют тонкой аппаратуры и опыта экспериментатора. Кроме того, проведение таких исследований требует времени, причем разного при определении разных гормо­нов, так что получение «моментальных» результатов редко воз­можно. Ничто не может привести заведующего лабораторией в большее уныние, чем требование определить уровень паратгормо­на в сыворотке за 10 мин после отправки пробы в лабораторию. Время, необходимое для проведения анализа, варьирует от не­скольких часов до нескольких дней в зависимости от метода опре­деления и определяемого гормона.

БИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

Результаты анализа гормонов, выполняемого в различных лабора­ториях, должны выражаться в общепринятых стандартных едини­цах. Результаты биологических исследований приводятся обычно в системе единиц международного стандарта, полу­чаемого из ВОЗ. Эти результаты могут быть выражены и в едини­цах препарата сравнения, получаемого лабораториями из центров, обслуживающих более ограниченные географические области. В таком случае результаты анализа следует сопровождать указанием на способ пересчета единиц препаратов сравнения в единицы международных стандартов. Хотя полипептидные гормо­ны и являются высокоочищенными, но в соответствующих препа­ратах присутствуют небольшие, но влияющие на результаты ана­лиза примеси; поэтому обычно избегают приводить результаты биологических и иных определений в единицах массы гормона. Количество большинства полипептидных гормонов, определяемое с помощью биологических или радиоиммунологических методов, оценивают в системе единиц, ранее установленных ВОЗ. С другой стороны, поскольку стероидные и тиреоидные гормоны существуют в химически чистом виде, результаты их определения обычно вы­ражают в единицах массы. Поскольку в разных лабораториях используют несколько (хотя и существенно) различающиеся реак­тивы и методики, каждая лаборатория должна определять пределы нормальных колебаний концентрации гормонов в пробах, отбирае­мых в стандартных условиях и анализируемых с помощью тща­тельно охарактеризованных реактивов или моделей биологического исследования.

ИССЛЕДОВАНИЯ IN VIVO

Биологические определения могут выполняться на моделях in vivo или in vitro путем оценки действия постепенно меняющихся доз препарата сравнения или стандарта и интерполяции физиологиче­ского эффекта, вызываемого гормоном, количеством которого в пробе неизвестно. Как правило, в качестве относительно специ­фичного показателя оценивают определенную реакцию, на дейст­вие гормона. Например, сравнивают реакцию массы органа-мише­ни на действие различных доз неизвестного и стандартного гормо­нального препарата. Для того чтобы результаты определения имели силу, кривые доза—реакция для препарата сравнения и не­известной пробы должны быть параллельными. Демонстративным примером служит биологическое определение активности ЛГ и ХГЧ in vivo по влиянию на массу вентральной части предстатель­ной железы. Лютеинизирующий гормон (гормон гипофиза) и ХГЧ (плацентарный гормон) обладают неотличимой биологической активностью. При этом исследовании постепенно увеличивающие­ся количества экстракта мочи вводят подкожно в дробных дозах гипофизэктомированным неполовозрелым самцам крыс на протя­жении нескольких дней и в конце этого периода определяют массу вентральной части предстательной железы. Точно так же вводят постепенно увеличивающиеся дозы препарата сравнения, обладающего известной удельной биологической активностью ЛГ или ХГЧ, и массу вентральной части предстательной железы сравни­вают с таковой у животных, получавших неизвестный препарат. Этот биологический метод адекватен для определения биологиче­ской активности как ЛГ, так и ХГЧ, поскольку оба гормона сти­мулируют синтез и секрецию тестостерона клетками Лейдига крысы, что в свою очередь через ряд биохимических этапов приводит к увеличению размеров вентральной части предстательной железы животного. Увеличение массы этого органа пропорционально коли­честву тестостерона, выделяемого семенниками, стимулированны­ми ЛГ и ХГЧ. Гипофизэктомированных животных используют для того, чтобы исключить синтез и секрецию тестостерона в ответ на эндогенный Л Г. Этот метод является одним из классических и все еще применяется для характеристики препаратов ЛГ и ХГЧ. Он был впервые предложен более 40 лет назад Greep и соавт., а впо­следствии модифицированы [1, 2].

Поскольку наклоны кривой доза-реакция от одного биологиче­ского определения к другому могут значительно варьировать даже при использовании одного и того же препарата, то каждый раз при определении необходимо производить статистический анализ на параллелизм между наклонами и однородностью отклонений кривых доза—реакция для стандарта или препарата сравнения и неизвестного препарата. В идеальном случае следует определить эффект не менее, чем в 3 достаточно отдаленных друг от друга точ­ках кривой доза—реакция с использованием проб от 3—5 животных на каждую точку для стандартного и неизвестного препарата. Только при параллелизме и гомогенности отклонений между стан­дартом и испытуемым препаратом можно сделать достоверный вывод о биологической активности и ее доверительных границах применительно к испытуемому препарату. При отсутствии такого параллелизма об активности испытуемого препарата судить нель­зя. Легко убедиться, что при биологических исследованиях любого типа не должно определяться действие в одной точке.

За многие годы предложено огромное число методов биологиче­ского тестирования in vivo . Некоторые из них достаточно грубы, нечувствительны и неспецифичны, например инсулиновые судоро­ги у мышей. Другие биологические методы значительно более спе­цифичны и чувствительны и продолжают применяться для харак­теристики очищенных гормональных препаратов.

ИССЛЕДОВАНИЯ IN VITRO

Большинство методов in vivo требует относительно больших объе­мов плазмы, мочи или тканевых экстрактов, содержащих достаточ­ное количество гормона, чтобы вызвать значимый биологический эффект. В связи с этим подобные исследования, хотя они очень важны для исходной характеристики различных гормональных препаратов, оказываются непригодными для рутинного клиниче­ского применения. За последние несколько лет разработаны раз­личные методы биологического исследования in vitro . Они не толь­ко специфичны, но и требуют значительно меньших объемов тка­невых экстрактов или биологических жидкостей, что отражает их большую чувствительность. К сожалению, такие методы требуют уровня квалификации, пока еще не доступного для большинства лабораторий, осуществляющих рутинные клинические анализы.

Как правило, критерием сравнения служат различные дозы известного гормонального препарата, по отношению к которым можно интерполировать реакцию, вызываемую неизвестной про­бой. Различные дозы или объемы неизвестной пробы исследуют в той же самой системе наблюдения, а варианты реакции как на не­известный препарат, так и на препарат сравнения или стандарт анализируют на параллелизм и гомогенность отклонений. Послед­нее требование обязательно для любых определений гормонов как in vivo , так и in vitro .

Примером биологической системы in vitro служат клетки Лей­дига, или интерстициальные клетки. Под влиянием стимуляции ЛГ пли ХГЧ клетки Лейдига синтезируют и секретируют тестостерон в количестве, зависимом от дозы стимулирующего гормона. С помо­щью известных методик [3] клетки Лейдига можно отделить от семенных канальцев. Эти клетки равномерно распределяют по пластинкам для клеточных культур и стимулируют различными концентрациями стандартных препаратов ЛГ и ХГЧ и различны­ми объемами неизвестной пробы. Тестостерон секретируется в культуральную среду, и его концентрация определяется специфи­ческим радиоиммунологическим методом.

При биологических исследованиях in vitro могут использовать­ся различные показатели; к ним относятся изменения концентра­ции стероидов, ферментов или циклических нуклеотидов. Вообще говоря, определения in vitro более чувствительны, чем соответству­ющие им определения in vivo , и требуют значительно меньших объемов экстрактов сыворотки, ткани или мочи. Однако при ин­терпретации результатов биологического исследования in vitro необходима особая осторожность, поскольку в такой системе гор­мон может быть биологически активным, a in vivo оказывать очень слабое действие. Это расхождение отражает тот факт, что гормон должен не только связываться со специфическим участком клеточ­ной поверхности и «запускать» определенную последовательность биохимических сдвигов, но и быть доставленным к соответствую­щим клеточным рецепторам в высокой концентрации, чтобы насы­тить достаточное для воспроизведения эффекта число рецепторов. В некоторых случаях в силу будто бы небольших модификаций структуры гормона его клиренс может изменяться в значительной степени.

Для того чтобы гормон вступил во взаимодействие с рецепто­ром, он должен быть биологически активным, т. е. иметь соответ­ствующую конформацию для связывания специфическим рецепто­ром с высоким сродством или прочностью связи. Однако гормон может быть биологически активным in vitro , но не обладать значи­тельной биологической активностью in vivo в силу измененного из-за своих структурных особенностей метаболического клиренса. При исследовании биологической активности десиалилированного ХГЧ in vivo и invitro обнаруживаются существенные расхождения ее [4—7]. После лишения молекулы ХГЧ сиаловой кислоты (десиалилация) in vitro гормон оказывает такой же, если не больший, биологический эффект, что и его нативная, полностью сиалилированная молекула [6, 7]. С другой стороны, in vivo он проявляет очень небольшую биологическую активность, отражающую сте­пень десиалилации его молекулы. Это расхождение определяется значительно более коротким периодом полужизни десиалилированного ХГЧ в плазме по сравнению с интактным гормоном [5]. В свя­зи с этим десиалилированный ХГЧ in vivo достигает своих клеток-мишеней в концентрации, недостаточной для воспроизведения значительного биологического эффекта.

Методы определения одного и того же гормона в системах in vitro обычно более чувствительны, чем в системах in vivo . Неко­торые методы биологического исследования in vitro обладают даже большей чувствительностью, чем радиоиммунологические методы определения концентрации гормона. Методы биологического ис­следования in vitro , в которых в качестве показателя эффекта используются не специфическое рецепторное связывание или ак­тивация аденилатциклазы, а другие биохимические процессы, обычно в десятки, а то и сотни раз более чувствительны, чем радиоиммунологические методы. Методы биологического определения гормонов in vitro в настоящее время не входят в число рутинных способов оценки состояния больного, за исключением тех редких случаев, когда можно предположить расхождение биологической и иммунологической активности гормона.

ЦИТОХИМИЧЕСКИЕ БИОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эти методы представляют собой варианты описанных биологиче­ских исследований in vitro . Они обычно обладают большей чув­ствительностью, чем радиоиммунологические методы, но значи­тельно более громоздки и дороги при расчете на одно определение. Результаты цитохимических биологических исследований количе­ственно оценивают на гистологических срезах с помощью специ­ального устройства — микроденситометра. Гистологические срезы готовят из специфических для данного гормона тканей или клеток-мишеней, до того подвергшихся воздействию разных концентра­ций стандартного и испытуемого гормона. С помощью денситомет­ра сканируют область диаметром 250—300 нм для количественной оценки цветной реакции, обусловленной изменением редокс-состояния объекта под влиянием гормональной стимуляции. Для коли­чественного анализа используют гистологические красители, чув­ствительные к этим изменениям.

Первая система цитохимического биологического исследования была разработана для АКТГ, и тканью-мишенью в этой системе служила кора надпочечников [8]. Другие способы биологического определения АКТГ либо слишком малочувствительны, либо требу­ют больших объемов плазмы. Таким образом, цитохимическое определение редокс-состояния ткани является ценным средством анализа нормальной и измененной функции системы гипотала­мус—гипофиз—надпочечники по уровню АКТГ. Разработан цито­химический метод определения и Л Г, но при этом встретились су­щественные трудности, связанные со значительными колебаниями результатов разных определений и непостоянной чувствительно­стью объекта, что, возможно, отражает известные биологические расхождения у разных животных [9]. Чувствительные специфиче­ские цитохимические методы предложены для определения парат­гормона, АД Г и тиротропина [10, 11]. При дальнейшем усложнении оборудования, которое позволит увеличить число исследова­ний в одном определении, этот метод может найти более широкое применение. Он особенно привлекателен потому, что не требует использования радиоактивных соединений. Цитохимические мето­ды нешироко применяются в клинике и используются в основном в качестве чувствительного способа в научных исследованиях.

Таблица 5—1. Биологические методы определения гормонов in vivo и in vitro

В табл. 5—1 перечислены различные биологические методы in vivo и in vitro , применяемые для определения полипептидных гормонов. Для многих гормонов специфические чувствительные методы биологического определения не разработаны.

ЛИГАНДНЫЙ АНАЛИЗ

РАДИОИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

Радиоиммунологические методы в настоящее время, вероятно, наи­более широко применяются для количественного определения гормонов и многих других соединений в биологических жидкостях. Как показывает само название, радиоиммунологический метод представляет собой иммунологическое исследование, в котором ис­пользуют меченые гормоны или связывающие их антитела. Более 20 лет назад Berson и Yalow [26] предложили радиоиммунологиче­ский метод определения инсулина. Этот метод основывался на их наблюдении, согласно которому в периферической крови больных диабетом, получавших инсулин, присутствует белок (который, как было показано позднее, является глобулином), связывающий инсулин, меченный 131 I Значение этих данных и последующей раз­работки радиоиммунологического метода определения инсулина подчеркивается присуждением Yalow и Berson нобелевской пре­мии. Вскоре после первых сообщений этих исследователей други­ми лабораториями были разработаны и описаны соответствующие методы для определения других гормонов. В этих методах приме­няются либо антитела, либо сывороточные белки, связывающие определенный гормон или лиганд и несущий радиоактивную мет­ку-гормон, конкурирующий со стандартным гормоном или гормо­ном, присутствующим в биологической пробе.

Термодинамически взаимодействие антигена и антитела можно рассматривать как реакцию псевдопервого порядка, которая схе­матически может быть представлена следующим образом

г де Аг — антиген или гормон, AT — антитело к антигену или гормону, Аг — радиоактивно меченный антиген или гормон. Kd — константа скорости диссоциации. Ка — константа скорости ассоциации.

Рис. 5—1. Кривые доза—реакция, полученные с помощью трех разных методов определения гормонов. а —преобразования данных в системе logit-координат, где N—импульсы, обуслов­ленные неспецифическим связыванием, В_о — максимальное число импульсов свя­занного гормона, когда в инкубационной среде присутствуют только антитела и меченый гормон; б — данные представлены как отношение импульсов связанного гормона (В) к импульсам ( F ) против логарифма концентрации гормона; в — кривая доза — реакция для определения стероидного гормона в координатах В/Т против дозы гормона, где Т — общее число импульсов.

Реакция антиген—антитело обратима, но скорость диссоциации комплекса антиген—антитело значительно меньше, чем скорость его ассоциации. Количество гормона, связанное с антителом, явля­ется результирующей скоростей ассоциации и диссоциации.

Поскольку в каждую пробирку вносят постоянную концентра­цию антител и меченого гормона, количество импульсов, связан­ных с антителами, должно зависеть от концентрации немеченого гормона, добавляемого в виде стандарта или неизвестной пробы. Чем выше концентрация немеченого гормона, тем меньшим ока­зывается количество импульсов, связанных с антителами, присут­ствующими в системе в фиксированной концентрации. На рис.5—1 приведены различные часто применяющиеся способы графическо­го изображения результатов радиоиммунологических исследований. Верхний график представляет собой кривую доза—реакция в логарифмических координатах, где по оси ординат отложено чис­ло импульсов гормона, связанного с антителами, приведенное к максимальному числу связанных импульсов (Во), когда инкубиру­ются только антитела и меченый гормон (без немеченого). Это по­строение в системе logit — log координат обычно представляет собой прямую линию, что облегчает визуальную интерполяцию количе­ства гормона в неизвестной пробе. С целью получения прямой линии, облегчающей визуальную интерполяцию количества гор­мона в неизвестных пробах, применяют различные способы транс­формации данных. Большинство результатов радиоиммунологиче­ских определений подвергается машинной обработке, позволяю­щей избежать утомительных и длительных расчетов.

Получение высокоочищенных гормонов дало возможность раз­работать чувствительные радиоиммунологические методы для точ­ного измерения низких физиологических уровней циркулирующих гормонов, требующие относительно малых объемов биологических жидкостей. Для чувствительных радиоиммунологических опреде­лений необходимо следующее 1 — высокоочищенный гормон, несущий радиоактивную метку с достаточно высокой удельной активностью, чтобы в каждую про­бирку можно было вносить только «следовые» его количества; 2 — реактивы, используемые в реакции присоединения метки, не должны изменять иммунореактивности гормона в существен­ной степени; 3 — антитела с достаточно высокой чувствительностью (сродст­вом) и специфичностью, чтобы определить низкие физиологиче­ские уровни нужного гормона; 4 — соответствующий препарат сравнения, по отношению к ко­торому можно было бы интерполировать неизвестные концентра­ции гормона в неизвестной пробе. Препарат сравнения и исследуе­мый гормон должны одинаково взаимодействовать с антителами и давать параллельные кривые доза—реакция.

В надежных системах для радиоиммунологического определе­ния концентрация меченого гормона и антител фиксирована. В связи с этим по мере увеличения концентрации немеченого гор­мон уменьшается вероятность связывания меченого гормона с антителами, что обусловливает обратное соотношение между чис­лом молекул меченого гормона, связанных с антителами, и концен­трацией немеченого гормона в реакционной смеси.

В отношении взаимодействия антигена с антителами прини­маются некоторые допущения 1 — присутствующий гормон гомогенен и взаимодействует с антителами с равным сродством независимо от того, содержит он радиоактивную метку или нет; 2 — присутствующие антитела гомогенны и одна молекула ан­титела взаимодействует с одной молекулой гормона; 3 — два разных вида молекул — гормон и антитела — реагиру­ют до тех пор, пока между ними не установится равновесие; 4 — применяется эффективное средство разделения связанного с антителами и свободного гормона, причем методика разделения не нарушает исходного равновесия, достигнутого между гормоном и антителами.

Хотя перечисленные допущения идеализируют ситуацию, но они приблизительно очерчивают условия радиоиммунологических исследований. С помощью соответствующих методов удается опре­делить такие концентрации гормонов, которые обычно не подда­ются определению большинством биологических методов in vivo . Под чувствительностью или наименьшей определимой дозой пони­мают ту концентрацию гормона, которая вызывает значимое изме­нение процента связывания меченого гормона с антителами при сравнении с «пустой» пробой. Чувствительность определения за­висит от сродства гормона к специфическим антителам.

ЙОДИРОВАНИЕ

Наиболее широко применяемым методом йодирования белков яв­ляется, вероятно, модифицированный метод, предложенный Green ­ wood , Hunter и Glover [27]. В нем используется окисляющий агент хлорамин Т, превращающий Na 125 I в свободный йод, который затем включается главным образом в остатки тирозина. При использова­нии этого метода могут йодироваться и остатки гистидина. Для сохранения максимальной иммунореактивности необходимо, чтобы на молекулу гормона приходился только один атом 131 I или 125 I, поскольку большая степень йодирования обычно снижает иммуно­логическую и биологическую активность гормона, изменяя его химические свойства [27].

В настоящее время применяют и другие способы йодирования. Второе по популярности место занимает, по-видимому, фермента­тивный метод с использованием лактопероксидазы [28, 29]. В при­сутствии перекиси водорода, добавляемой непосредственно в реак­ционную смесь, лактопероксидаза превращает Na 125 I в свободный йод, который избирательно включается в остатки тирозина. По­скольку перекись водорода является сильным окислителем, дейст­вие ее высоких концентраций на гормон может изменять его химические свойства; поэтому перекись водорода обычно добавля­ют двумя или тремя небольшими порциями, которые быстро ис­пользуются в реакции. Другим, более новым, но менее распростра­ненным методом йодирования, является метод, разработанный Bolton и Hunter [30]. В нем возможность вредных эффектов хлора­мина Т, бисульфита натрия и перекиси водорода, применяемых в двух других методах йодирования, на гормон сводится к минимуму. С помощью хлорамина Т йодируют промежуточное соединение-­сложный эфир, образованный N-оксисукцинимидом и 3-(р-оксифенил)-пропионовой кислотой, которое затем конденсируется с аминогруппами полипептидного гормона. Такой подход позволяет избежать воздействия на гормон сильных окислителей или восста­новителей. Эта методика несколько громоздка и пока не получила широкого распространения.

Рис. 5—2. Схематическое изо­бражение молекулы g -глобулина или антитела. Участки, «узнающие» гормон, могут содержать разные аминокис­лотные области легких и тя­желых цепей иммуноглобули­на. Легкие цепи ковалентно связаны с тяжелыми дисуль­фидными мостиками, обозна­ченными знаком S . Одна дисульфидная связь имеется и между двумя тя­желыми цепями. Недавно полученные данные указывают на Y-образную конфигурацию молекулы иммуноглобулина, в которой участки коплексирования с антигеном расположены в верхней части этой фигуры.

В настоящее время используют не Na 131 I , a Na 125 I , поскольку он обладает значительно большим периодом полураспада: 59 дней вместо 6. Однако при работе с 125 I необходима особая тщатель­ность, так как его удельная g -активность значительно ниже, чем у 131 I. Стероидные гормоны и витамин D метят тритием, что позволя­ет получить более высокую удельную активность, чем с помощью метки 14 C. Полипептиды, не имеющие в своем составе остатков ти­розина или гистидина, можно модифицировать, вводя или присо­единяя тирозин к их структуре без видимого изменения конформа­ции нативного соединения. Выбирают такие замещения, которые с наименьшей вероятностью изменят конформацию молекулы.

ПОЛУЧЕНИЕ АНТИСЫВОРОТКИ

Антитела принадлежат к классу иммуноглобулинов и являются преимущественно g -глобулинами (IgG). Молекула IgG состоит из 4 полипептидных цепей: двух тяжелых и двух легких, располо­женных симметрично и ковалентно связанных друг с другом дисульфидными мостиками. Схематическое изображение этой моле­кулы приведено на рис. 5—2. Взаимодействие антигена, или лиган­да, с антителом можно уподобить контакту «замка и ключа». Форма комплексобразующего участка антитела комплементарна тако­вой участка антигена. Связь между антигеном и антителом обу­словлена сочетанием электростатических, водородных и ван-дер-ваальсовых взаимодействий [31, 32]. Форму связывающего участка и тем самым сродство и специфичность связи молекулы IgG с нужным антигеном определяет аминокислотная последователь­ность комплексообразующего участка этой молекулы [33].

Для получения системы определения гормона высокоочищен­ный гормон вводят лабораторным животным, индуцируя у них синтез иммуноглобулинов, обладающих достаточно высокой специ­фичностью и чувствительностью, чтобы их можно было использо­вать для радиоиммунологических определений. Как правило, со­единения с размерами молекул менее 1000 дальтон недостаточно иммуногенны и для придания им свойств активных нммуногенов их нужно соединять с молекулой-носителем. Иммуногеном назы­вается вещество, способное индуцировать образование антител. Для того чтобы обеспечить возможность индукции антителообразо­вания, небольшие молекулы, или гаптены, можно соединять с та­кими веществами, как альбумин, тироглобулин или гемоцианин. Иммуногенная реакция обычно выше в случае введения тех бел­ков-носителей, которые и сами являются высокоиммуногенными. В связи с этим такие вещества, как альбумин, тироглобулин и ге­моцианин являются более подходящими белками-носителями, чем полилизин или другие синтетические полиаминокислоты, при ин­дукции синтеза специфических антител к конъюгированным гаптенам. Стероиды, тиреоидные гормоны (трийодтиронин и тироксин) и различные формы витамина D, как правило, требуют конъюга­ции с белками-носителями. Необходимо тщательно следить за тем, чтобы в процессе конъюгации стероидов и других гаптенов прини­мала участие та часть молекулы, изменение которой в наименьшей мере сказывалось бы на стереоспецифичности этой молекулы. На­пример, антитела к 17 b — эстрадиолу лучше всего образуются при ковалентном присоединении его 6-кетоаналога к альбумину, т. е. при сохранении интактности 3- и 17-гидроксильных групп, равно как и кольца А, стероида. Последнее особенно важно, поскольку именно эти структуры придают данному эстрогену специфичность.

За многие годы разработаны разнообразные методики иммуни­зации, но все они, по существу, являются модификациями ориги­нальной методики Фрейнда [34]. Эмульсия, содержащая гормон, или иммуноген, соответствующее масло и убитые нагреванием ту­беркулезные палочки, вводят внутри- или подкожно. С получе­нием высокоочищенных гормонов и других производных удалось разработать методику иммунизации малыми количествами имму­ногена [35]. Имеются надежные экспериментальные доказательст­ва образования специфических обладающих высоким сродством антител к малым дозам иммуногена [36]. Именно малые дозы иммуногена с наибольшей вероятностью обусловливают продук­цию специфических иммуноглобулинов теми клетками, которые образуют антитела с наиболее высоким сродством к иммуногену. В связи с этим при применении больших доз иммуногена повыша­ется вероятность выработки антител, обладающих низким сродст­вом. При введении очень больших доз иммуногена у иммунизиро­ванных животных может наблюдаться феномен толерантности, когда антитела вообще не образуются или образуются в очень низких титрах [37, 38]. После начальной иммунизации обычно дол­жно пройти минимум 6 нед, чтобы появились значительные титры антител. Сродство антител продолжает увеличиваться и достигает максимума обычно между 8-й и 12-й неделей после начальной иммунизации [35, 39]. Эмпирически установлено, что повторная иммунизация животного обеспечивает лучшую реакцию в том слу­чает, если повторные инъекции производят в период снижения титра циркулирующих антител. При повторном введении 1/2 или 1/4 дозы гормона, использованной при первичной иммунизации, значительное повышение титра циркулирующих антител наблюдается уже через несколько дней. Повторную иммунизацию животного следует производить в ту же анатомическую область, в кото­рую иммуноген вводили первый раз. Больше того, для воспроизве­дения реакции «по памяти» уже не нужно вводить убитые нагре­ванием туберкулезные бациллы, которые могут увеличивать забо­леваемость и смертность животных.

Для получения специфических антител следует выбирать те виды животных, которые легко доступны, не слишком дороги и у которых структура своего собственного эндогенного гормона зна­чительно отличается от применяемого для иммунизации. Напри­мер, хотя СТГ у животных разных видов обладают одинаковой биологической активностью, но они существенно различаются по аминокислотному составу. Эти различия в первичной структуре, как и некоторые другие недостаточно охарактеризованные факто­ры определяют иммуногенность гормона для других видов живот­ных. В некоторых случаях аминокислотные последовательности могут различаться относительно слабо и поэтому нужно с особой тщательностью подбирать вид животного, которому вводят гормон. Например, структура инсулина у человека, кролика и овцы почти одинакова, но инсулины человека и морской свинки различаются сильнее. Для получения специфических антител к инсулину чело­века лучше всего использовать именно морских свинок [40].

ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ СИСТЕМЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ

После получения антител от иммунизированного животного и опре­деления их концентрации проводят оценку чувствительности и спе­цифичности антисыворотки. Концентрацию антител в сыворотке вначале определяют по связыванию меченого гормона, который применяли для иммунизации, причем используют разные разве­дения антисыворотки. Этот способ называется титрованием и под титром понимают концентрацию молекул антител в сыворотке. После нахождения той концентрации антител, которая в равновес­ных условиях связывает 30—40% меченого гормона, определяют чувствительность и специфичность антител. Получение и харак­теристика специфических систем для определения ХГЧ и инсули­на очень подробно изложена в других публикациях и может слу­жить ориентиром при получении других специфических радиоим­мунологических систем определения гормонов.

В реальных условиях антитела, получаемые для использования в клинических радиоиммунологических исследованиях, содержат популяцию иммуноглобулинов, обладающих различной специфич­ностью и сродством. Следует выбрать антисыворотку, содержащую популяцию антител с достаточно высоким сродством и специфич­ностью к тому гормону, который предстоит определить. На прак­тике выбрать такую популяцию антител с высоким сродством мож­но путем достаточно высокого разведения антисыворотки, чтобы роль других популяций антител, обладающих низшим сродством и, возможно, неспецифических, стала относительно несущественной.

Рис. 5 —3. Кривая доза — реакция для ХГЧ- a , определяемого в гомологич­ной для него радиоиммунологической системе. Три кривые доза — реакция для ХГЧ-а получены в условиях, отличающихся только концентрацией антител к ХГЧ- a . При увеличении начального отношения В/Т с 25 до 60% вследствие увеличения концентрации антител точка на оси абсцисс, соот­ветствующая 50% снижению исходного связывания, сдвигается с 0,12 до 0,24 нг в пробе. 1 — В/Т=25%: 2 — В/Т=32%: 3 — В/Т =60%. Обозначения см. на рис. 5-1;

При выборе такого разведения антисыворотки, которое отлича­ется от использованного вначале для характеристики системы, необходимо заново определить ее чувствительность и специфич­ность, поскольку в ином разведении концентрация других по­пуляций антител может оказаться относительно высокой, и разве­денная антисыворотка будет обладать меньшей чувствительностью и специфичностью. Такая ситуация графически представлена на рис. 5—-3, на котором кривая доза—реакция для высокоочищенного лиганда смещена вправо, что отражает снижение чувствитель­ности системы по мере увеличения концентрации антител. Поскольку гормоны содержатся в крови в относительно низких концентрациях (10 –12 —10 –9 М), необходимо отбирать антитела с высоким сродством и специфичностью. Сродство и специфичность каждого разведения антител нужно определять эмпирически. Боль­ше того, антисыворотка, получаемая от одного и того же животно­го в разное время после иммунизации, может обладать сущест­венно различающимися сродством и специфичностью по отноше­нию к гормону, которым иммунизировали животное.

СПЕЦИФИЧНОСТЬ СИСТЕМЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Следует учитывать как структуру, так и степень очистки гормо­на, используемого для иммунизации. Гликопротеиновые гормоны человека (ЛГ, ФСГ и ТТГ), а также хорионический гонадотропин, имеют общую четвертичную структуру и состоят из двух различ­ных субъединиц, обозначаемых как a и бета [42]; a -субъединица, по существу, совершенно одинакова во всех этих гормонах с точки зрения ее аминокислотной последовательности. Иммунологическую и биологическую специфичность этим гормонам придает b — субъ­единица. В связи с этим необходимо тщательно выбирать антисы­воротку, полученную к любому из гликопротеиновых гормонов, и тщательно проверять, достаточно ли она специфична, чтобы мож­но было определить концентрацию данного гормона в присутствии в той же пробе высокого уровня других гликопротеиновых гормо­нов. В некоторых случаях перекрестной реакции, обусловленной общностью антигенных детерминант, можно избежать, адсорбируя антитела на общем антигене. Например, если антисыворотка к ТТГ обнаруживает перекрестную реакцию с ФСГ и ЛГ и эта перекрест­ная реакция обусловлена общими детерминантами a -субъединицы, то данную антисыворотку можно очистить с помощью свободной a -субъединицы или ХГЧ, который содержит a -детерминанты. Такая «очищенная» антисыворотка в идеальном варианте специ­фична по отношению к ТТГ и практически не менее чувствительна к этому гормону.

Проблема еще больше усложняется в связи с тем, что b — субъ­единицы ХГЧ и ЛГ обладают выраженной структурной гомологи­ей, что и делает биологическую активность этих двух молекул неотличимой. В результате антитела, образующиеся к целым моле­кулам ЛГ и ХГЧ, по всей вероятности, будут взаимодействовать с любой из них и обоими вместе. Поскольку некоторые опухоли экто­пически секретируют ХГЧ и поскольку высокие концентрации ХГЧ присутствуют и в нормальных условиях при беременности, при обычном определении ЛГ должны получать завышенные ре­зультаты, трактовать которые нужно с большой осторожностью. Наилучшим клиническим доказательством преимущественного присутствия в периферической крови ХГЧ, а не ЛГ, является рез­кое расхождение концентраций ЛГ и ФСГ в одной и той же пробе; Загрязнение гормонального препарата, используемого для им­мунизации животного, другим гормоном может создавать и другие методические проблемы. Даже в высокоочищенных препаратах гормонов гипофиза человека присутствуют небольшие, но сущест­венные примеси других гипофизарных гормонов. Это справедливо также для гормонов, получаемых в чистом виде из поджелудочной железы и желудочно-кишечного тракта. Очевидно, что у иммуни­зированного этими гормонами животного могут образовываться антитела к любому из попавших в его организм гормонов, в том числе и к тем, которые присутствовали в виде примесей, В связи с этим необходимо знать источник гормона, поскольку в процессе его очистки могут одновременно очищаться и другие гормоны, попадающие в конечный препарат. В идеальном случае следовало бы проверить структурное сходство гормонов, так как именно оно может служить основой перекрестной реактивности некоторых ан­тисывороток по отношению к разным гормонам.

ЭФФЕКТ СЫВОРОТОЧНЫХ БЕЛКОВ

Поскольку между различными стероидами, между тироксином и трийодтиронином и некоторыми их метаболитами и между различ­ными формами витамина D отмечается выраженная структурная гомология, не всегда возможно получить антисыворотку, доста­точно специфическую, чтобы без предварительного применения методов экстракции и разделения избирательно определять эти гормоны и их метаболиты. Некоторые гормоны циркулируют в кро­ви, будучи связанными со специфическими белками-переносчика­ми или более рыхлой связью с альбумином. Для того чтобы избе­жать загрязнения радиоиммунологической системы связывающими белками сыворотки, необходимо вначале экстрагировать гормон соответствующим растворителем. Начальную экстракцию следует проводить и при малой специфичности антител к гормону. В неко­торых случаях может оказаться достаточной дифференциальная экстракция, но в других необходимо произвести хроматографическое разделение гормонов. К наиболее распространенным средст­вам разделения структурно близких стероидов относятся тонко­слойная хроматография и хроматография на колонках сефадекса LH -20. Поскольку крупные полипептидные гормоны циркулируют в крови, не будучи связанными с белками-переносчиками, началь­ный этап экстракции в этом случае не нужен, и аликвоту сыворот­ки можно прямо помещать в пробирку для анализа. Однако содер­жащиеся в сыворотке протеазы могут обусловить занижение кон­центрации некоторых полипептидных гормонов. Если разрушение гормона существенно изменяет его структуру, он может и не реа­гировать с антителами. В результате появляется необходимость добавления в пробу ингибиторов ферментов, чтобы противодейст­вовать эффекту протеаз. К ингибиторам протеаз, добавляемых в сосуды с пробами на АКТГ, глюкагон и другие гормоны, которые могут подвергаться быстрой протеолитической деградации, отно­сятся трасилол и бензамидин.

В отношении некоторых полипептидных гормонов отмечаются неспецифические эффекты сывороточных белков. Эти неспецифи­ческие белковые эффекты можно нивелировать, добавляя пустую сыворотку в пробирки для исследования, не содержащие сыворот­ки, с тем, чтобы все пробирки содержали сравнимые концентрации мешающих определению сывороточных белков. Каждую антисыворотку можно эмпирически проверять на неспецифический эффект белка в отношении реакции антиген—антитело.

РАЗДЕЛЕНИЕ СВЯЗАННОГО И СВОБОДНОГО ГОРМОНА

Существуют различные способы разделения связанного с антите­лами и свободного гормона. В системах для полипептидных гормо­нов обычно применяют «методику вторых антител». Поскольку исходный комплекс гормона с антителом растворим, с помощью простого центрифугирования разделить связанный и свободный гормон невозможно. В связи с этим после достижения равновесия между гормоном и первыми антителами добавляют вторые антите­ла, полученные на g -глобулин животного того вида, у которого получали первые антитела. Поскольку вторые антитела будут те­перь связывать образовавшийся комплекс между гормоном и пер­выми антителами, то возникнет вторичный нерастворимый моле­кулярный комплекс, и связанный свободный гормон можно будет отделить простым центрифугированием. Например, если антите­ла к гастрину вырабатывались у кролика, то вторые антитела к кроличьему g -глобулину следовало бы получать у животного дру­гого вида (лошади, овцы или козы). Лошадиный антикроличий глобулин нужно было бы добавить в пробирку для анализа после установления равновесия в реакционной смеси, содержащей мечен­ный 125I гастрин и кроличью антигастриновую сыворотку. Время, необходимое для установления равновесия реакции со вторыми антителами, зависит от концентрации кроличьей сыворотки-носи­теля в реакционной смеси. Например, если первые антитела к гас­трину получены от кролика, в пробирку для анализа можно допол­нительно добавить кроличью сыворотку-носитель или глобулин. Если кроличья сыворотка-носитель занимает 2% объема пробир­ки, то для осаждения кроличьего g -глобулина следует добавлять относительно большой объем вторых антител (0,05—0,2 мл). Поскольку равновесие достигается за время, определяемое первым законом действующих масс, то оно должно достигаться относи­тельно быстро (за несколько часов). Это время вначале находят эмпирически и подбирают необходимый наименьший оптимальный объем вторых антител для каждой их партии, получаемой в лабо­ратории или от торговых фирм. В пробирки для анализа можно добавлять меньшие концентрации сыворотки- носителя, что умень­шит необходимый объем вторых антител, но увеличит время, тре­буемое для достижения равновесия реакции с их участием.

ЦИРКУЛИРУЮЩИЕ ЭНДОГЕННЫЕ АНТИТЕЛА

Если в сыворотке больного присутствуют эндогенные антитела, то при определении, проводимом с помощью метода двойных анти­тел, могут быть получены завышенные результаты. Теоретически меченый гормон, добавленный в пробирку для анализа, свяжется либо с антителами больного, содержащимися в пробе сыворотки, либо с антителами, вносимыми в пробирку. Будучи получены на g -глобулин животного, у которого вырабатывали первые антитела, вторые антитела не должны осаждать гормон, связанный с g -глобулином человека, который останется в виде растворимого ком­плекса в супернатанте. В связи с этим осадок будет обладать мень­шей радиоактивностью, что отразит меньшее содержание связан­ного гормона. Поскольку концентрация гормона в пробе обратно пропорциональна количеству осажденного меченого гормона, то результат определения концентрации гормона окажется ошибочно завышенным. Все это схематически изображено на рис. 5—4. Циркулирующие антитела обычно встречаются у больных диабетом, леченных инсулином. Если у больного подозревают присутствие таких антител, то для разделения связанного с антителами и сво­бодного гормона следует применять не метод вторых антител, а какой-либо иной метод. Этого можно достичь различными путями, в том числе осаждением g -глобулином человека или сульфатом аммония. Для точного определения количества антител к данному гормону в пробе сыворотки больного существует ряд дополнитель­ных приемов.

Рис. 5—4. Схематическое изображение типичной радиоиммунологической реакции с двойными антителами (а). Наряду с добавленными в качестве известного реагента антителами в пробе присутствуют и эндогенные анти­тела к гормону (б). Эндогенные антитела искажают результаты определе­ния концентрации гормона в системе двойных антител, поскольку некото­рые комплексы гормон — антитело не осаждаются вторыми антителами, взаимодействующими с кроличьим (но не человеческим) g -глобулины .

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СТЕРОИДОВ

Стероидные гормоны обычно содержатся в сыворотке в связанном с различными белками виде. Поскольку сывороточные белки могут обладать сродством к гормону, сходным со сродством антител, используемых в радиоиммунологическом анализе, то чтобы по­следний дал надежные результаты, гормоны нужно сначала экс­трагировать, т. е. отделить от сывороточных белков. До широкого распространения радиоиммунологических методов кортизол и дру­гие сходные стероиды, которые ассоциируются с кортизолсвязывающим глобулином (КСГ), определяли методами конкурентного белкового связывания, в которых использовали этот белок-переносчик. В настоящее время такой подход применяют реже, поскольку при этом приходится характеризовать каждую партию сыворотки, из которой извлекают КСГ, и требуется более детальное разделение стероидов с помощью тонкослойной хроматографии. Необходимость всех этих начальных этапов исследования, требующих дополни­тельного времени, а также более широкий разброс результатов от анализа к анализу отодвинул данный метод на второй план по отношению к радиоиммунологическому.

Наиболее распространенным средством разделения связанных с антителами и свободных стероидных гормонов является покрытый декстраном уголь. Он адсорбирует стероиды, не связанные с анти­телами, и переводит их в осадок. Растворимый же комплекс гор­мон—антитело остается в супернатанте. В системах определения стероидов, в которых используется гормон, меченный тритием, супернатант можно декантировать в сосуд, содержащий жидкий сцинтиллятор. В некоторых системах определения стероидных гормонов используют меченые тирозилированные стероиды. В этих случаях разделение связанного и свободного гормона проводят обычно методом двойных антител.

ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К МЕТОДУ

Помимо проверки чувствительности и специфичности антисыво­ротки, а также возможности проявления неспецифических эффек­тов белков плазмы или сыворотки, необходимо убедиться в надеж­ности стандартного гормона, используемого для интерполяции ко­личества гормона в биологической пробе. Сходство реакции на стандарт и клинический образец нужно оценивать путем построе­ния кривых доза—реакция для каждого из них, используя различ­ные дозы гормона или различные объемы пробы и проверяя парал­лельность этих кривых. Как отмечалось в разделе, посвященном биологическим методам, интерполяция дозы возможна только -в случае существования такой параллельности. Для контроля каче­ства гормонального стандарта нужно при каждом исследовании не только проверять наклон кривой доза—реакция, но и находить на оси абсцисс точку, которая соответствует 50% снижению исход­ного связывания. Кроме того, дополнительно следует в каждой системе радиоиммунологического определения гормона с парал­лельными пробами анализировать пулы сывороток, заведомо содер­жащих низкие, средние и высокие концентрации определяемого гормона. При радиоиммунологических исследованиях отмечается значительно меньший разброс результатов, чем при использовании биологических методов. В связи с этим в большинстве лабораторий при обычных радиоиммунологических определениях не анализиру­ют разные объемы клинических проб, если не предполагается гете­рогенность гормона.

Наконец, должна осуществляться независимая проверка надеж­ности нового метода радиоиммунологического исследования с по­мощью физиологических коррелятов и какого-либо иного, предпоч­тительнее — биологического, метода определения гормона. Вероят­но, наиболее частыми причинами изменения гормональной секре­ции являются фармакологические или пищевые воздействия, и они часто применяются для того, чтобы выяснить, будут ли ожидаемые физиологические изменения концентрации гормона «улавливать­ся» с помощью нового метода.

РАДИОРЕЦЕПТОРНЫЙ АНАЛИЗ

Принцип радиорецепторного метода по существу не отличается от радиоиммунологического, только гормон, вместо того чтобы связы­ваться с антителами, связывается со специфическим гормональ­ным рецептором плазматической мембраны или цитозоля. Специ­фические рецепторы большинства полипептидных гормонов рас­полагаются на наружной поверхности плазматической мембраны клеток, тогда как рецепторы биологически активных стероидов, а также тироксина и трийодтиронина — в цитозоле и ядрах [43, 44]. Чувствительность радиорецепторного анализа ниже, чем радиоим­мунологического и большинства биологических методов в системах in vitro . Для того чтобы взаимодействовать со своим рецептором, гормон должен иметь соответствующую конформацию, т. е. быть биологически активным. Возможна ситуация, в которой гормон теряет способность связываться со своим рецептором, но продол­жает взаимодействовать с антителами в системе для радиоиммуно­логического анализа. Это расхождение отражает тот факт, что ан­титела и рецепторы «узнают» разные участки молекулы гормона.

Предложен ряд радиорецепторных методов гормонального ана­лиза. Обычно получают ткань специфического для данного гормо­на органа-мишени и с помощью стандартных методик выделяют из нее рецепторы. Изолированные рецепторы плазматической мембра­ны в осадке при хранении в условиях температуры менее —20 °С относительно стабильны. Однако солюбилизированные рецепторы полипептидных и стероидных гормонов, выделенные из плазмати­ческих мембран либо из цитозоля и не связанные с лигандами, ока­зываются нестабильными, что проявляется снижением их способ­ности связывать специфические гормоны, даже если они храни­лись в замороженном виде, сравнительно недолго.

Йодирование полипептидных гормонов должно осуществляться с помощью методов, изменяющих их биологическую активность лишь в минимальной степени. Для сохранения биологической активности на каждую молекулу гормона должен прихо­диться один атом йода. Чрезмерное йодированно обычно зна­чительно изменяет биологическую и иммунологическую актив­ность гормона. Кроме того, некоторые реактивы, используемые в процессе йодирования, являются сильными окислителями или восстановителями, и поэтому их концентрация должна быть сведена к минимуму. Применяющиеся в настоящее время методы йодирования описаны ранее.

Рис. 5—5. Скетчардовский график данных, по­лучаемых при радиоре­цепторном исследова­нии.

ХАРАКТЕРИСТИКА ГОРМОНРЕЦЕПТОРНОГО СВЯЗЫВАНИЯ

Для характеристики взаимодействия гормона с рецептором или антителом предложены различные методы математического анали­за. При взаимодействии гормона [Г] с его специфическим рецеп—тором [Р] простая обратимая реакция между двумя молекулами в условиях равновесия может быть охарактеризована как

где [ГР] — гормонрецепторный комплекс. Предполагается, что как гормон, так и рецептор гомогенны и имеют один специфически свя­зывающий участок. Взаимодействие гормона и рецептора далее можно описать следующим образом

где К_а—равновесная константа ассоциации (л/моль или М

1 ), k_a — константа скорости ассоциации, k _a — константа скорости диссоциации, K_d — константа диссоциации (моль/л, или М).

Зависимость между общей концентрацией рецепторов и концен­трацией занятых рецепторов может быть изображена следующим образом

где [Ро] — общая концентрация рецепторов, [ГР]— концентрация связанных с гормоном рецепторов, а [Р] — концентрация свобод­ных рецепторов.

Преобразуя приведенные выражения, можно получить уравне­ния (5—4а) и (5—46), которые при графическом написании дают обычно прямолинейную зависимость с наклоном, равным — 1/К _a , или — К _а

Уравнения (5—4а) и (5—46) являются математическим напи­санием графика Скетчарда, в виде которого данные о гормонре­цепторном взаимодействии представляются, вероятно, наиболее часто [45, 46]. Эти уравнения применяются также для характери­стики взаимодействия гормона с антителами. График Скетчарда представлен на рис. 5—5. Точка пересечения кривой с осью абс­цисс представляет собой [Р_о), а с осью ординат К_а[Р_о],или (1/ K_d ) [Р_о]. Наклон линии равен — К_а, или —1/K_d. Следовательно при графическом изображении данных по отрезкам осей координат можно непосредственно определить [Р_о] и [ГР]/[Г]. Для расчета Ка используют следующие рассуждения. Поскольку член —К_а[ГР] из уравнения (5—46) при нулевом количестве связанного гормона [ГР] становится равным нулю, то

где В — концентрация связанного гормона, а F — концентрация свободного гормона, или

Зная молярную концентрацию рецептора, можно определить число связывающих участков на клетку или на массу белка, умно­жив количество молей рецептора на 6,02•10 23 (число Авогадро, или число молекул в моле).

Константы ассоциации, полученные в разных радиорецептор­ных исследованиях, обычно колеблются между 10 –11 и 10 –9 M –1 . Однако не все графики Скетчарда линейны. Их нели­нейность отражает аллостерическое межрецепторное взаимодейст­вие, приводящее к повышению (положительная кооперативность) или снижению (отрицательная кооперативность) связывания гор­мона после начального взаимодействия его с рецепторами. Данные,. полученные в исследованиях по рецепторному связыванию гормо­на, можно преобразовывать дальше, и с помощью графика Хилла выяснить, действительно ли в системе происходят аллостерические взаимодействия [47, 48]. Если наклон прямой на графике Хилла значительно отличается от единицы, то они существуют. При полу­чении нелинейного графика Скетчарда следует учитывать не толь­ко аллостерические взаимодействия, но и другие факторы. К ним относятся артефакты, обусловливаемые проведением анализов в неравновесных условиях, неточной оценкой неспецифического свя­зывания, ошибками в разделении свободного и связанного гормона и значительными различиями сродства к рецептору меченого и не­меченого гормона [49].

ГОРМОНАЛЬНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ И ПАТОЛОГИЧЕСКИЕ СОСТОЯНИЯ

Описан ряд клинических состояний, при которых нарушается вза­имодействие между гормоном и его специфическим рецептором. Такие нарушения объясняют изменением числа рецепторов или их сродства к гормону, а также спонтанным образованием антител к гормональным рецепторам. У больных с атаксией -телеангиэктази­ей может отмечаться резкая инсулинорезистентность вследствие выраженного уменьшения сродства рецепторов к инсулину [50]. У некоторых больных со злокачественной миастенией образуются антитела к экзогенным рецепторам ацетилхолина, что и обуслов­ливает развитие соответствующего клинического синдрома [51]. Подобно этому у больных с acanthosis nigricans клинически выяв­ляется инсулинорезистентность, причем результаты обследования таких больных убедительно свидетельствуют о роли антител к ин­сулиновым рецепторам в имеющейся инсулинорезистентности [52]. Число специфических рецепторов инсулина, приходящееся на каж­дую клетку, может быть снижено при ожирении, вследствие чего у тучных больных уменьшается чувствительность к инсулину. При уменьшении массы тела у этих больных число инсулиновых рецеп­торов на клетку увеличивается и нормализуется чувствительность к инсулину [53]. У некоторых больных с гипертиреозом в крови присутствуют антитела к рецепторам ТТГ. В отличие от больных со злокачественной миастенией и диабетом, у таких больных анти­тела к рецепторам ТТГ могут стимулировать мембранные рецепторы в ткани щитовидной железы, индуцируя повышенную продук­цию и секрецию тироксина и трийодтиронина, что и обусловливает гипертиреоидное состояние [54].

В отдельных случаях концентрация рецепторов стероидных по­ловых гормонов может определять успех определенных видов терапии [55, 56]. Так, вмешательства в деятельность эндокринной системы оказывают благоприятный эффект у женщин, больных раком молочной железы в пременопаузе, у которых раковая ткань содержит рецепторы эстрогенов. Такие вмешательства приносят успех у 50—70% женщин, у которых выявляется значительная концентрация рецепторов эстрогенов в опухоли, и менее чем у 10% больных, раковая ткань у которых не содержит соответствующих рецепторов. В качестве эндокринотерапии применяется обычно хирургическое удаление яичников, надпочечников и гипофиза. Предложены различные антиэстрогенные лекарственные вещества, к которым относятся нафоксидин, тамоксифен и кломифен. Боль­ные в пременопаузе, леченные сочетанием воздействий на эндо­кринную систему, выживают в течение гораздо более длительного срока, чем лица, не получающие соответствующего лечения.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ЗАМЕЧАНИЯ

КОЛЕБАНИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ АНАЛИЗА

Контроль за качеством радиоиммунологических систем, равно как и моделями для биологического определения гормонов in vivo и in vitro , настоятельно необходим. Для того чтобы результаты ис­следования имели силу, следует убедиться в параллельности кри­вых доза—реакция для препарата сравнения и неизвестной пробы. Как правило, каждая радиоиммунологическая и биологическая ( in vitro ) система для анализа требует исследований параллельных проб плазмы или гормона, что позволяет оценить колебания ре­зультатов как для данной системы, так и между системами. Кон­троль за качеством систем дает возможность определить стабиль­ность и воспроизводимость результатов. Вариационные коэффици­енты в пределах каждой системы обычно в 2 раза меньше, чем между системами. В связи с этим если ожидаются относительно небольшие, хотя и существенные, различия между пробами, лучше всего анализировать их с помощью одной системы (набора).

СТАБИЛЬНОСТЬ ГОРМОНОВ

После высвобождения из железы некоторые гормоны быстро рас­падаются и циркулируют в крови в виде фрагментов. Лучше всего это видно, вероятно, на примере ПТГ, который вскоре после выде­ления в кровь распадается на аминоконцевой и карбоксильно-концевой фрагменты. Последний фрагмент имеет гораздо более дли­тельный период полужизни в крови, чем аминоконцевой. Однако биологической гормональной активностью обладает именно амино­концевой фрагмент. При выработке антител к нативному ПТГ у иммунизированного животного могут появиться антитела к амино­концевому, карбоксильно-концевому или обоим фрагментам моле­кулы. Нормальные колебания концентрации ПТГ различаются в зависимости от специфичности антител, используемых для его определения. Другие гормоны, такие, как глюкагон и АКТГ, быст­ро разрушаются в плазме под действием содержащихся в ней про­теаз. Для того чтобы избежать этого, необходима специаль­ная обработка проб. Как правило, при получении их в пробирки добавляют ингибиторы протеаз, такие, как трасилол или бензамидин.

Другая методическая проблема возникает в том случае, когда гормоны секретируются в разных формах. Существуют, например, различные формы гастрина — «минигастрин», «малый гастрин», «большой гастрин» и «очень большой гастрин». С помощью боль­шинства методов определения гастрина при непосредственном ана­лизе проб не удается различить эти формы. В результате пробы предварительно следует подвергнуть гель-фильтрации, чтобы убе­диться в присутствии разных физических форм гормона. Это отно­сится и к другим гормонам, таким, как пролактин, инсулин и АКТГ. Более крупные формы обычно являются предшественника­ми меньших биологически активных нативных молекул.

Поскольку концентрация гормонов в сыворотке может изме­няться в зависимости от времени суток, позы больного, метабо­лического состояния и собственного ритма с периодичностью от нескольких минут до нескольких недель, отбор проб необходимо производить в одинаковых условиях. О нормальных колебаниях уровня данного гормона судят обычно на основании анализа проб, собранных в стандартных условиях. Должно быть совершенно ясным, что концентрация гормона, найденная с помощью макси­мально надежной аналитической системы, не будет иметь смысла, если анализируемые пробы получены в несоответствующее время или при несоответствующем метаболическом состоянии больного. Последнее может иметь важное значение особенно при определе­нии концентрации в крови ренина, альдостерона, СТГ, инсулина или глюкагона. Физическая активность, равно как и стресс, могут значительно изменять исходный уровень в крови пролактина, АКТГ, кортизола, ренина, альдостерона или СТГ. Наконец, син­тез и секреция гормонов могут изменяться под влиянием разнооб­разных лекарственных средств. Такие вещества, как резерпин, альдомет и фенотиазины, повышают содержание пролактина в кро­ви и, больше того, могут вызывать клинически значимую галакто­рею. Диуретики обычно увеличивают исходное содержание ренина в крови. В связи с этим важно предусматривать не только конт­роль за качеством системы определения, но и за условиями, в кото­рых отбирают биологические пробы. Без оптимизации того и дру­гого результаты определений окажутся бессмысленными.

Источник статьи: http://campodinamico.ru/elektrohemilyuminestsentnyy-metod-opredeleniya-gormonov-chto-eto/

Электрохемилюминесцентный метод определения гормонов что это

Подготовительные действия к сдаче анализа крови на женские половые гормоны

Норма УЗИ щитовидной железы у детей

Для лечения щитовидки наши читатели успешно используют Монастырский чай. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Щитовидная железа как важный эндокринный орган принимает непосредственное участие в развитии и росте ребенка.

Полноценное функционирование эндокринной системы во главе с железой способно обеспечить нормальную работу детского организма в целом.

Родителям важно знать нормы объема щитовидной железы у детей для того, чтобы вовремя обнаружить возникшую патологию и предупредить ее дальнейшее развитие.

Значение щитовидной железы

В тканях щитовидной железы происходит физиологическая выработка важных тиреоидных гормонов — трийодтиронина, тироксина и кальцитонина, которые участвуют в метаболизме.

От этих гормонов напрямую зависят энергетические процессы в организме, обмен веществ, рост скелета, формирование опорно-двигательной системы, состояние центральной нервной системы, работа почек и органов пищеварения, а также общее физическое развитие ребенка.

Вот почему полноценная работа железы необходима в любом возрасте, особенно если дело касается детей.

Для ребенка потенциально-опасна как гиперфункция железы, так и дефицит тиреоидных гормонов, который чреват развитием кретинизма — самого тяжелого осложнения врожденной формы гипотиреоза.

Чтобы определить состояние эндокринного органа, в первую очередь, необходимо исследовать уровень гормонов.

Нормы гормонов щитовидки у детей могут меняться в зависимости от возраста ребенка, но эти показатели не следует сравнивать с показателями взрослого человека.

Также у детей всегда, в первую очередь, определяется уровень тиреотропного гормона — секрета гипофиза, поскольку именно он несет ответственность за регуляцию выработки гормонов фолликулами железы.

Если уровень тиреотропного гормона будет выходить за пределы нормы, значит речь идет о возможной эндокринной патологии, и вслед за этим ребенку назначается комплексное исследование тиреоидных гормонов.

В наши дни существует обязательный перечень исследований скринингового типа, которые необходимо проводить каждому новорожденному.

В условиях родильного дома на пятые сутки после появления на свет обязательно берется анализ из пяточки ребенка для исследования гормонов железы.

Если в ходе этого диагностического мероприятия будут обнаружены какие-либо отклонения от нормы, — малышу безотлагательно назначается консервативное лечение.

Щитовидная железа: норма у детей

Начиная с рождения и до достижения малышом двух лет физиологический объем эндокринного органа не должен превышать 0,84 мл.

До шести лет этот показатель способен вырасти до 2,9 мл.

Интенсивный рост щитовидной железы отмечается в подростковом возрасте, особенно в промежутке между 13 и 15 годами: если у тринадцатилетних мальчиков объем органа варьируется в пределах 6,0-8,7 мл, то в пятнадцать лет нормой принято считать объем 8,1-11,1 мл.

У девочек-подростков размер щитовидной железы будет несколько больше: в тринадцать лет 7,0-9,5 мл, в пятнадцать лет 9,0-12,4 мл.

Приведенная выше норма размеров щитовидной железы у детей может варьироваться в зависимости от особенностей организма, но не выходить за пределы допустимых значений.

При любом отклонении от нормы, речь идет о патологическом состоянии эндокринного органа и нарушении его функционального значения. Заболевание может быть врожденным или приобретенным.

Важно вовремя определить наличие патологии и выяснить причину возникших отклонений.

Для этого нужно диагностировать состояние гормонального фона ребенка, структурное строение и объем щитовидной железы.

По статистике, раннее обнаружение эндокринной патологии в детском возрасте имеет благоприятный прогноз на выздоровление и адаптационные возможности ребенка к современной жизни.

Болезни щитовидной железы, как правило, быстро и легко лечатся, что является несомненным преимуществом в детской эндокринологии.

Как определить размеры щитовидной железы

С профилактической целью обязательно измеряется щитовидная железа ребенка — размеры, норма которых является важным диагностическим моментом на наличие возможных патологий органа.

Способы измерения могут быть следующими:

• исследование щитовидной железы с помощью пальпации проводится эндокринологом путем ощупывания каждой доли органа, с целью определения его структуры, состояния и консистенции;
• исследование с помощью узи щитовидной железы у детей, норма и патологии которой будут определены с высокой точностью;
• исследование с помощью рентгенографии и компьютерной томографии, — это самые высокоинформативные методы диагностики.

УЗИ щитовидной железы у детей

Ультразвуковое исследование с высокой точностью определяет патологии эндокринного органа.

Нормы показателей щитовидной железы у детей во время УЗИ-диагностики должны быть следующими.

Форма здоровой щитовидной железы всегда будет иметь ровные и четкие контуры.

Расположенные рядом с органом лимфатические узлы не должны быть увеличены.

Размер паращитовидных желез должен составлять 4х5х5 мм. В случае любых обнаруженных отклонений речь идет о возможном заболевании.

Если отмечается высокая эхогенность органа и его неоднородное строение, — это говорит о воспалительном процессе в тканях железы.

Уплотнения, которые можно отличить от здоровых тканей, свидетельствуют о наличии доброкачественного процесса — узловых изменениях, аденоме, или злокачественного процесса — рака.

Обнаруженная полость округлой формы с четкими границами и жидким содержимым является кистой.

Если ультразвуковое исследование подтвердило рост щитовидной железы, то есть ее размеры выходят за границы нормы, — будет диагностирована гиперплазия органа или диффузный токсический зоб.

В противном случае, уменьшенные размер железы говорят о гипотиреозе — недостаточной функции органа.

Отечность на фоне заметного увеличения железы информируют врача о наличии тиреоидита — воспалительного процесса в ее тканях. В зависимости от причины заболевания назначается соответствующее лечение.

Щитовидная железа будет в норме, если о результатам УЗИ-исследования не возникнет отклонений в измерении объема, а также формы и структуры органа.

При любых обнаруженных изменениях следует обратиться к врачу.

Болезни щитовидной железы в детском возрасте

В последние годы число детей, страдающих заболеваниями щитовидной железы, неуклонно растет.

Возможно, причиной этому становится постоянно ухудшающаяся экология и некачественное питание.

Основными причинами патологий эндокринной системы по-прежнему остаются хроническая нехватка йода в организме и неблагоприятная наследственность.

В большинстве случаев проблемы с щитовидной железой у ребенка начинаются еще в период внутриутробного развития, если в организме будущей матери отсутствует необходимое количество йода или имеются заболевания эндокринного типа.

В этом случае ребенок еще до рождения сталкивается с серьезными проблемами, которые отражаются на развитии и состоянии его собственной щитовидной железы.

К примеру, выраженный гипотиреоз беременной женщины может стать причиной самопроизвольного прерывания беременности, наступления преждевременной родовой деятельности, формирования пороков развития у плода, рождения ребенка с физическими патологиями и недостаточным интеллектом.

Как и взрослое население, дети подвержены следующим заболеваниям щитовидной железы:

Для лечения щитовидки наши читатели успешно используют Монастырский чай. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Гипотиреоз

Недостаточная выработка щитовидной железой тиреоидных гормонов называется гипотиреозом.

Это заболевание встречается у одного новорожденного на четыре тысячи рождений, при чем среди девочек патология диагностируется в несколько раз чаще.

Дефицит гормонов щитовидной железы негативно отражается на росте и развитии всех органов и систем, а особенно на интеллекте ребенка.

Соответствующую лечебную терапию следует начинать с первых дней обнаружения гипотиреоза, чтобы максимально смягчить возможные последствия заболевания.

Гипертиреоз

Состояние характеризуется избыточной выработкой тиреоидных гормонов, что приводит к ускорению всех жизненно-важных процессов, протекающих в организме.

Симптомами гипертиреоза являются нарушение сердечного ритма в сторону тахикардии, повышение кровяного давления, выраженная нервозность, раздражительность и плаксивость, склонность к судорожному синдрому и гиперактивность.

Если у ребенка диагностирован гипертиреоз, важно незамедлительно начинать его лечить, так как болезнь, оставленная без внимания, медленно разрушает организм, вызывая осложнения сердечно-сосудистой системы, органов пищеварительного тракта, опорно-двигательного аппарата.

В конечно итоге нелеченная гиперфункция железы приводит к опасному для жизни состоянию — тиреотоксическому кризу.

Тиреоидит Хашимото

Это аутоиммунная патология эндокринной системы, в результате которого угнетаются функции железы и происходит ее постепенное разрушение собственными антителами иммунной системы.

Симптомами болезни являются

• выраженная сухость кожных покровов,
• повышенная утомляемость и сонливость,
• набор лишнего веса.

Лечение щитовидной железы в детском возрасте

Лечением эндокринных заболеваний в детском возрасте занимается врач-эндокринолог.

Своевременная диагностика и раннее обнаружение патологического процесса чаще всего эффективно поддается терапевтическому воздействию и имеет благоприятный прогноз на выздоровление.

Что такое горячие и холодные узлы щитовидки?

Если диагностирован горячий узел щитовидной железы, что это такое, не знает практически никто.

А это некое состояние щитовидной железы, сопровождающееся возникновением опухоли в ее тканях.

Подобные новообразования бывают разными: беспокоящими и бессимптомными, злокачественными и доброкачественными.

Лечение, соответственно, выбирается от вида патологии.

Некоторые опухоли можно не трогать, так как они не угрожают жизни человека, другие же представляют серьезную опасность.

Горячие узлы щитовидной железы как раз и относятся к таким опасным новообразованиям.

Чтобы не довести до такого и не чувствовать постоянную зависимость от таблеток, рекомендуем Монастырский Чай — единственное натуральное средство, которое разработано для восстановления функции щитовидной железы, общей нормализации гормонального фона и профилактики заболеваний, связанных с его нарушением. Он состоит ТОЛЬКО из натуральных компонентов и не имеет неприятных побочных действий.
Данный препарат не продается в аптеках, и его не рекламируют в интернете. Чтобы вы не подумали, что вам втюхивают очередную «панацею от всех болезней», я не буду расписывать, какое это действенное средство… Если интересно, читайте всю информацию о нем сами. Вот ссылка на официальный сайт.

Причины развития узлов в щитовидной железе

У большинства людей узлы растут медленно, почти всю жизнь и становятся заметны только в глубокой старости. Они не представляют опасности.

Чаще всего появляются у женщин. Если же узел вырос в короткий срок и начал влиять на продуцирование гормонов, то такое новообразование является серьезной угрозой не только здоровью, но и самой жизни пациента.

Причины, являющиеся предпосылками для роста узлов в щитовидной железе:

1. Генетическая предрасположенность.
2. Недостаточное содержание йода в организме человека.
3. Лучевая терапия.
4. Следствие отравления токсическими веществами.

Какие бы причины не вызвали образование узлов, быстроразвивающаяся болезнь требует срочного изучения и экстренного лечения.

Холодные и горячие узлы

Занимаясь раскрытием вопроса о горячих узлах в щитовидной железе, нужно упомянуть о возникновении терминов «холодный» и «горячий» узлы.

Они возникли при изучении щитовидной железы с помощью радиоизотопного сканирования.

Известно, что клетки железы отделяют йод от выделяемых гормонов, поэтому, воздействуя на них радиоактивным йодом, можно увидеть степень поглощения клетками данного элемента прямо на экране сканера.

Холодные узлы состоят из клеток, не поглощающих йод, а горячие узлы, соответственно, из клеток, принимающих его.

В науке существует определенная статистика, которая показывает, что в большинстве случаев узлы в щитовидной железе состоят из холодных клеток: примерно 80%, а горячих — всего около 5%.

Остальные 15% — это так называемые теплые узлы. Все эти новообразования доброкачественные.

Холодный узел щитовидной железы не выделяет никаких гормонов, то есть эта опухоль абсолютно нейтральна, и йод она не поглощает совсем.

Такое явление в медицине получило следующее название: гипотиреоз. Это заболевание проявляется поздним физическим развитием ребенка, характерным разрезом глаз, слабой мускулатурой и значительным отставанием в психическом развитии.

Если говорить коротко, то врожденный гипотиреоз вызывает кретинизм.

Теплый узел выделяет такое же количество тиреоидных гормонов, что и здоровая ткань щитовидной железы.

Узел в щитовидной железе, поглощающий йод, то есть горячий, выделяет повышенное количество тиреоидных гормонов — это и есть причины гипертиреоза.

Диагностические мероприятия

Для того чтобы обследовать щитовидную железу на предмет наличия опухолей, применяется ультразвуковое исследование.

Однако этот метод может обнаружить узел, но не сообщить, какого характера клетки его образовали, то есть какой это узел: горячий, теплый или холодный.

УЗИ может обнаружить довольно маленькую опухоль: до 1 см в диаметре.

Определить активность клеток опухоли можно с помощью биопсии. В ходе этого исследования изучается несколько клеток щитовидной железы, полученных с помощью длинной иглы, вводимой в орган, а точнее в опухоль.

Данная процедура для больного проходит как глубокий внутримышечный укол: неприятный, но терпеть его можно. А главное — биопсия обязательно нужна для назначения правильного лечения.

Чтобы избежать травмирования и добиться большей эффективности, биопсия проводится под контролем ультразвукового наблюдения.

Данная процедура определяет характер опухоли: злокачественная она или доброкачественная, а также активность клеток в ней.

Если биопсия показала злокачественную опухоль, то лечить ее возможно только 1 способом: только операция по удалению пораженного органа избавит больного от недуга.

В других ситуациях терапия предполагает различные варианты.

В список диагностических мероприятий обязательно входит:

1. Лабораторное изучение крови пациента. При этом определяется уровень тиреоидных гормонов, чтобы подтвердить или исключить гипотиреоз.
2. Изучение мочи.
3. Анализ работа сердца с помощью электрокардиограммы.
4. Проводится рентгеновское исследование грудной клетки.

Обязательно назначается сцинтиграфия — это процедура, с помощью которой можно увидеть на экране, какими являются обнаруженные узлы: холодными, теплыми или горячими.

Для этого в кровь пациента вводится радиоактивный изотоп, «подсвечивающий» клетки щитовидной железы.

Данное вещество для человека безопасно и уже через несколько часов выводится из организма с мочой.

Симптомы появления горячего узла

Лечение горячего узла зависит от правильной его диагностики.

Но, как и при любом другом заболевании, существует ряд симптомов, позволяющих сделать вывод, что у человека развивается горячий узел в щитовидной железе.

Так как орган находится в горле, то появление опухоли заставляет человека испытывать постоянное удушье, дискомфорт при глотании и пропадание голоса.

У людей с дефицитом веса опухоль на горле можно заметить невооруженным глазом или легко ощупать пальцами, особенно если пациент женщина, ведь на горле без адамова яблока любое новообразование видно очень хорошо.

В случае с мужчинами опухоль хорошо видна, если она поразила часть правой или левой доли щитовидной железы.

Если опухоль слишком мала, то о ее наличии можно судить по следующим проявлениям:

• повышенная сонливость;
• быстрая утомляемость;
• волосы больного становятся тонкими и ломкими;
• у больного появляются психологические проблемы: он становится крайне неуравновешенным;
• появляются частые запоры.

Данные проявления характерны, если у больного гипотиреоз.

При возникновении в щитовидной железе именно горячих узлов, или гипертиреоза, проявления могут быть следующими:

• больной постоянно испытывает сильные голод и жажду;
• масса тела больного быстро теряется;
• психология такого человека также становится ранимой: он раздражается по пустякам;
• тремор конечностей;
• аритмия;
• в глазах появляется лихорадочный блеск;
• в редких случаях гипертиреоз проявляется выпирающими глазными яблоками.

Лечение гипертиреоза

Лечение горячего узла щитовидной железы, как правило, хирургическое. Консервативным методом прекратить интенсивную выработку тиреоидных гормонов практически невозможно.

Лечение медикаментами проводится лишь как подготовка к операции по удалению самой опухоли или всей железы целиком.

Пациент принимает синтетические тиреоидные гормоны, а также натуральные вещества, выделенные из грецкого ореха, черноголовки и других лекарственных растений.

После операции по удалению доли щитовидной железы или всего органа уровень тиреоидных гормонов резко падает, и для поддержания их на необходимом уровне человек до конца жизни должен принимать, прописанные ему заменяющие препараты.

Как правило, этой заменой является L-тироксин. Если больной после операции станет пренебрегать заместительной терапией, то у него может развиться гипотиреоз.

Профилактика появления горячих и холодных узлов в щитовидной железе

Профилактика появления различных опухолей на щитовидной железе довольна проста: надо внимательно поддерживать необходимый уровень йода в организме.

Этим веществом богата, например, морская капуста, значит, надо регулярно ее употреблять в пищу.

Самым простым способом поддержания приемлемого уровня йода в организме является употребление в пищу йодированной соли. Рекомендуем ознакомиться со свойствами обогащенной молекулами йода воды Йодис-Концентрат.

Этими нехитрыми действиями можно значительно снизить риск возникновения опухоли.

И не нужно ждать, пока симптомы узла щитовидной железы дадут о себе знать: следует 1 — 2 раза в год проходить осмотр у врача эндокринолога.

Это поможет не только вовремя заметить растущую опухоль, а значит, значительно упростить лечение, но и не допустить ее появления в принципе.

Надо будет только придерживаться советов врача в диете и образе жизни.

Источник статьи: http://shchitovidka-gormon.ru/shhitovidnaya-zheleza/elektrohemilyuminestsentnyj-metod-opredeleniya-gormonov-chto-eto/